收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

TBTI-Ⅱ的分离纯化及功能分析

赵卓慧  
【摘要】: 天然蛋白酶抑制剂(Proteinase Inhibitor,PI)是一类对蛋白酶活性有抑制作用的蛋白质。这类蛋白质普遍存在于动物、植物和微生物中,是自然界含量最为丰富的蛋白种类之一。根据它们作用于酶的类型,分为丝氨酸蛋白酶抑制剂、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中,因丝氨酸蛋白酶抑制剂分布广泛,种类繁多,在蛋白质一级结构、抑制剂作用机理、氨基酸组成及生物功能活性等方面有较为深入的研究。 植物蛋白酶抑制剂几乎存在于各类植物中,主要分布于植物的种子和块茎中,是一种天然的植物防御保护蛋白。荞麦是起源于我国的蓼科小杂粮作物,其丰富的营养成分和较高的药食兼用价值已逐渐受到了人们的关注。目前,国内外研究者对普遍种植的甜荞麦进行了较多的研究,而对苦荞麦的研究却相对较少。 本文以山西苦荞为研究材料,经过缓冲液提取,盐析及离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,从其种子中分离纯化了胰蛋白酶抑制剂。与本实验室先前的工作相比,新分离到的抑制剂(TBTI-Ⅱ)是一类小分子量的蛋白质。通过对其生化性质的分析,发现该抑制剂的等电点约为6.55-6.58,具有较好的热稳定性,含有较多的酸性氨基酸和碱性氨基酸,与牛胰蛋白酶发生竞争性抑制作用。 荞麦生长于高寒地区,喜瘠耐凉,具有良好的抗病抗虫能力。为了检测苦荞种子的TBTI-Ⅱ是否具有抗虫活性,我们将不同活力单位的抑制剂样品掺入到棉铃虫的饲料中,并与正常饲料喂养的棉铃虫进行体重和相对生长抑制率的比较。结果显示,分离纯化的抑制剂TBTI-Ⅱ具有明显的抑制害虫生长的作用,用最高抑制剂活力的饲料(200U/500g湿重)进行喂养时,害虫的相对抑制生长率达到了50.4%。 通过以上实验,我们对分离到的小分子量抑制剂TBTI-Ⅱ进行了生化性质的分析和抗虫活性的鉴定。结果显示,该抑制剂与荞麦抑制剂中的一种暂时性抑制剂(temporary inhibitors)有很相似的性质,很可能属于马铃薯抑制剂Ⅰ家族(Potato Proteinase Inhibitor-Ⅰ),但需要对其N端氨基酸或氨基酸全序列的测定才能得以进一步确证。从TBTI-Ⅱ的氨基酸组成来看,较高含量的Asn(10%)和Gln(22.5%)又提示,抑制剂可能以贮藏蛋白的形式提供荞麦种子发育所需的营养成分。TBTI-Ⅱ对棉铃虫也表现出明显的抑制其生长发育的活性,但其具体的作用机理及虫体内消化酶体系发生的相应变化都需要做进一步探索。 我们对荞麦蛋白酶抑制剂的性质和功能作了初步的研究,这为今后深入开展荞麦的营养学,荞麦蛋白酶抑制剂抵抗病害虫的侵袭及其生理、生化等方面的研究都具有重要的理论和实践意义。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 顾娟;洪雁;顾正彪;;荞麦淀粉理化性质的研究[J];食品与发酵工业;2008年04期
2 李凤林;;荞麦乳酸菌饮料的制备[J];粮油加工;2009年04期
3 杜双奎;李志西;于修烛;;不同部位荞麦粉营养价值分析[J];粮油加工;2006年04期
4 张诚彬;;荞麦加工新技术[J];粮油食品科技;2007年02期
5 邱向梅;;荞麦粉蛋糕生产工艺技术的研究[J];食品科学;2007年08期
6 尹荣方;;“烧拔”与“冷淘”[J];寻根;2007年05期
7 周翠英;;荞麦也能做蛋糕[J];农家女;2008年01期
8 王焕章;荞麦制品的加工工艺[J];农产品加工;2004年02期
9 王转花,张政,Ivan Kreft;荞麦α-淀粉酶抑制剂的初步研究[J];食品科学;2004年10期
10 周秀琴;;荞麦豆乳及荞麦豆腐制造法[J];现代食品科技;1988年04期
11 高峰;陈洁;王春;李华伟;;荞麦方便面的研究[J];食品科技;2009年07期
12 洪雁;顾娟;顾正彪;;体内外实验测定荞麦淀粉消化特性[J];食品科学;2010年05期
13 邵佩兰;徐明;;麦麸膳食纤维荞麦面条的工艺条件优化[J];农业科学研究;2006年04期
14 刘焕云;李敬;丁凤娟;;荞麦保健梳打饼干的工艺研究[J];粮油加工;2007年06期
15 张国权;陈盛军;罗勤贵;梅仕峰;郑爽;;荞麦粉主要组分对抗性淀粉形成的影响[J];粮食加工;2008年05期
16 朱振宝;易建华;;荞麦面包保水性影响因素研究[J];食品工业科技;2010年02期
17 张文华;林雪;肖迪;吴巨贤;石晓艳;王维民;;荞麦粉中总黄酮的提取工艺优化[J];广东农业科学;2011年01期
18 一民;风味独特的日本荞麦豆乳[J];食品科技;1988年04期
19 程俊丽;田晋;冯翠萍;;荞麦粉中黄酮类化合物提取工艺的研究[J];农产品加工(学刊);2009年05期
20 栗丽萍;王寿东;;谷朊粉对高含量荞麦面条品质的影响[J];农业机械;2011年08期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 张守文;郝彦玲;;黑米、薏米、荞麦粉混合后进行挤压膨化的研究[A];中国粮油学会第二届学术年会论文选集(综合卷)[C];2002年
2 李国龙;闫梅梅;师俊玲;王向丽;;谷氨酰胺转胺酶对荞麦方便面加工特性及食用品质的影响[A];2007年中国农业工程学会学术年会论文摘要集[C];2007年
3 陈启众;杨建军;;苦荞粉对2型糖尿病患者血糖指数影响的研究[A];中国营养学会第八届临床营养学术会议暨第三届营养与肿瘤会议论文摘要汇编[C];2001年
4 曾福元;;枳实与白术在炮制上的改进——附60例小儿厌食症治疗[A];’98全国中药研究暨中药房管理学术研讨会论文汇编[C];1998年
5 林月萍;汪少芸;浇平凡;;兼具能量缓释与营养保健功能的荞麦面条的研制[A];中国食品科学技术学会第八届年会暨第六届东西方食品业高层论坛论文摘要集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 秦培友;我国主要荞麦品种资源品质评价及加工处理对荞麦成分和活性的影响[D];中国农业科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张吉文;发酵法应用于荞麦改性的研究[D];吉林农业大学;2011年
2 邱卓;荞麦醋功能性研究[D];西北农林科技大学;2013年
3 尉立刚;荞麦火腿肠生产工艺研究及质量标准制定[D];山西大学;2010年
4 程琳娟;荞麦面包、蛋糕的研制及其营养价值的研究[D];武汉工业学院;2010年
5 焦维娜;高营养荞麦茶的研究[D];陕西科技大学;2013年
6 许铮;内蒙古西部地区荞麦产业化发展研究[D];内蒙古大学;2013年
7 毛瑞;荞麦馒头制作特性的研究[D];河南工业大学;2013年
8 兰海龙;荞麦系列食品生产工艺研究[D];陕西科技大学;2014年
9 王思明;营养型荞麦膨化食品配方及工艺优化的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
10 邓春丽;谷氨酰胺转氨酶及葡萄糖氧化酶处理对荞麦工艺品质的影响研究[D];西北农林科技大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李再贵;日本:年夜饭吃荞麦面[N];粮油市场报;2011年
2 本报记者 万佳怡;荞麦:粮中珍品食中宝[N];粮油市场报;2011年
3 刘继林;养生保健巧食“糊”[N];家庭医生报;2007年
4 隆旺夫;秋荞种植可选下列良种[N];湖北科技报;2005年
5 若依;日对中国产荞麦、木耳实施命令检查[N];国际商报;2007年
6 刘文君;今年前五个月我国绿豆出口量增加 红小豆出口同比减少[N];粮油市场报;2008年
7 本报记者 刘宪银;48种食品下架7种京产[N];华夏时报;2006年
8 闵存云;糖尿病患者食疗方[N];家庭医生报;2006年
9 马宝山;杂粮也有“药性”[N];大众卫生报;2007年
10 ;不同种类的挂面其特点有何不同?[N];中国质量报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978