收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

RhoA/ROCK信号通路在氟致小鼠智力损伤中的作用及其机制

陈玲丽  
【摘要】:课题组前期研究结果发现:氟中毒可引起子代大鼠大脑皮层和海马神经元的病理学损伤、神经细胞凋亡、DNA损伤、学习认知能力下降以及细胞骨架相关蛋白MAP2的表达显著抑制。细胞骨架损伤在氟诱导智力紊乱过程中的作用如何?本研究以此为切入点,ICR小鼠和Neuro-2A细胞为研究对象,研究细胞骨架蛋白在氟中毒发生机制中的作用。1氟化钠对子代小鼠大脑皮层神经细胞骨架及突触相关蛋白表达的影响本研究通过自由饮用含氟水(0,50,100mg/L)建立氟中毒ICR子代小鼠模型,以0d,10 d,20 d,30 d,60 d和90 d子代小鼠大脑皮层为研究对象,研究细胞骨架损伤在氟致神经损伤过程中发挥的作用。采用水迷宫试验测定60 d子代小鼠学习记忆能力,结果显示氟处理组小鼠的学习记忆能力受到显著影响,潜伏期显著延长,并且穿过目标象限次数减少。HE染色观察到氟处理组大脑皮层锥体细胞数量减少,胶质细胞核皱缩和碎裂。氟暴露组小鼠大脑皮质MAP2、SYP和Dbn的mRNA和蛋白表达水平均不同程度受到抑制,谷氨酸受体蛋白的表达也出现下降趋势(P0.05)。推断,氟抑制了骨架蛋白和突触相关蛋白表达,继而影响中枢神经系统信号的传递,最终引起子代小鼠学习记忆能力下降。2氟化钠对神经细胞骨架及神经信号传递的影响本研究以Neuro-2A细胞为试验对象,分别外源添加0,1,2,4,6mMNaF孵育24 h,探讨氟对神经细胞骨架损伤的影响。结果显示:氟暴露能降低神经细胞的存活率(P0.05),细胞上清中LDH的含量增多(P0.01),细胞膜的通透性增强,且呈现剂量依赖性;光学显微镜观察神经细胞形态,氟处理后神经细胞开始变圆,贴壁性差,细胞正常形态和突触逐渐消失,F-actin染色结果也证实了这一结果;利用透射电镜观察神经细胞超微结构的变化,发现:氟处理组神经细胞线粒体凝集,空泡化,细胞水肿,并呈现剂量依赖性。Western blot检测结果显示,NaF处理组MAP2和SYP的表达量显著下降(P0.05),谷氨酸及其受体蛋白含量也受到明显抑制(P0.05)。推测:NaF引起神经细胞骨架紊乱,导致突触数量和突触小泡蛋白表达量减少,从而影响了神经细胞信息传递功能。3氟对神经细胞RhoA/ROCK信号通路的影响为了探讨氟暴露对神经细胞中RhoA/ROCK信号通路的影响,本研究以子代小鼠大脑皮层和Neuro-2A为研究对象,研究NaF引起的神经细胞骨架损伤与RhoA/ROCK信号通路的关系。酵母双杂交结果发现MAP2与肌球蛋白有功能互作的可能性;利用鬼笔环肽和β-tubulin双染色法观察细胞骨架状态,发现:随着NaF浓度的增加,突触数量及分枝逐渐减少,微丝和微管由突触回缩至胞体,细胞核轮廓模糊不清,核固缩变小;Real-time PCR和Western blot检测细胞骨架相关蛋白Tau蛋白的表达,结果显示:与对照组相比,氟处理后神经细胞Tau mRNA水平逐渐下降(P0.05),低剂量NaF处理组(1和2 mM NaF)神经细胞Tau蛋白水平显著升高但是高剂量组(4和6 mM NaF)又显著下降(P0.01);体内试验结果显示子代小鼠大脑Tau mRNA水平略有上升,但其蛋白水平在大多数试验组普遍下降,其中10 d和60 d低氟组却显著性升高(P0.05)。氟处理神经细胞后,低剂量NaF(1和2 mM)可激活RhoA/ROCK信号通路,但是高剂量NaF(4和6 mM)又能抑制蛋白水平的表达(P0.05)。体内试验RhoA/ROCK信号通路显著被激活。ROCK抑制剂Y-27632处理Neuro-2A细胞,结果发现:与NaF单独处理组相比,Y-27632可抑制NaF引起的RhoA/ROCK信号通路激活,RhoA、ROCK和p-MLC的蛋白表达量均受到抑制;同时Y-27632与NaF共同孵育可提高神经细胞的存活率,并且神经细胞的突触丰富,轴突延长;氟中毒引起的神经细胞骨架蛋白MAP2与Tau的表达抑制也得到缓解(P0.05)。结论:NaF能激活RhoA/ROCK信号通路,调控细胞骨架的重构,进而影响神经细胞突触可塑性及神经细胞功能的发挥。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前17条
1 范久亿;李军;丁士刚;;Wnt信号通路在结直肠侧向发育型肿瘤中的研究进展[J];胃肠病学;2018年11期
2 王雪;张评浒;;Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与自噬调控作用的研究进展[J];中国药科大学学报;2017年01期
3 许莹萍;王菲菲;李大金;王凌;;雌激素-雌激素受体信号通路对趋化因子的调控作用研究进展[J];生殖医学杂志;2017年09期
4 苏依拉其木格;;Hedgehog信号通路在肺癌中的研究进展[J];健康之路;2016年09期
5 滕振平;邢飞跃;;细胞外信号调节激酶1/2信号通路对B淋巴细胞的影响[J];中国药物与临床;2007年01期
6 杜婵;姜保国;;许旺细胞增殖和分化过程中的信号通路[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年03期
7 史琳琳;赵锋;高学军;李庆章;;乳蛋白合成信号通路的研究进展[J];中国畜牧兽医;2013年01期
8 舒扬;向敏;;Wnt信号通路在中枢神经系统中的作用及相关机制[J];江苏医药;2018年08期
9 刘晓光;陈佩杰;肖卫华;;Wnt信号通路在骨骼肌损伤修复过程中的作用及机制研究[J];生命的化学;2018年05期
10 刘艳芳;吴志远;;分子信号通路在瘢痕疙瘩中的研究进展[J];海南医学;2017年07期
11 郭龙;张春媚;高勇;赵忠岩;;ARDS发病机制的相关信号通路研究进展[J];中国实验诊断学;2017年09期
12 樊姿影;曾昊蓝;张世鹰;卢芳国;杨胜辉;;P38MAPK信号传导通路在HF治疗中的应用[J];环球中医药;2015年S1期
13 黄朝帅;陈二涛;冯东福;;神经干细胞增殖和分化相关信号通路的研究进展[J];临床神经外科杂志;2013年04期
14 张陶涛;王小竞;邢向辉;;牙根发育启动相关信号通路的研究进展[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2011年09期
15 许永安;付小兵;;毛囊干细胞增殖与分化相关信号通路研究进展[J];中国修复重建外科杂志;2010年02期
16 匡野;李佩玲;;瘦素信号通路与小鼠生殖[J];中国优生与遗传杂志;2008年03期
17 张从红;冯华君;周春玲;王丁婷;赵飞鹏;赵冲;许胜恩;覃纲;;基于生物信息学方法鉴定头颈部鳞状细胞癌的关键基因及信号通路[J];中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志;2019年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 彭丽;章杰;刘伟;;病理性瘢痕相关信号通路的研究进展[A];2015江西省首届医学美容整形联合学术会议、江西省医学会第十一次医学美学与美容学术研讨会、江西省第四次中西医结合医学美容学术会议论文汇编[C];2015年
2 孔祥辉;孙朝晖;黄晓军;;p38 MAPK信号通路与勃起功能障碍的相关研究进展[A];首届男性大健康中西医协同创新论坛暨第三届全国中西医结合男科青年学术论坛论文集[C];2019年
3 王尚琦;刘静;刘超;肖晶;;BMP信号通路产生贯通性腭裂的机制研究[A];2019年中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十三次全国口腔病理学术会议论文汇编[C];2019年
4 曾令启;叶章群;陈志强;杨为民;高文喜;;草酸激活人肾小管上皮细胞p38 MAPK信号通路的研究[A];中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集[C];2016年
5 王俊成;;炎症因子对成骨细胞分化过程中BMP信号通路的的影响[A];中华口腔医学会口腔修复学专业委员会第十次全国口腔修复学术大会论文集[C];2016年
6 苟黎明;李春洁;李龙江;;经典Wnt信号通路在下颌下腺分支形态发生过程中的作用与机制的初步研究[A];2017全国口腔颌面——头颈肿瘤外科学术研讨会论文集[C];2017年
7 谢玲;项晓琼;胡迎春;范宝星;霍艳英;李邦印;段瑞峰;张开泰;吴德昌;;细胞定位与信号通路检测技术在hrnt-1基因功能研究中的应用[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全国中青年学术交流会论文汇编[C];2001年
8 苟黎明;李春洁;李龙江;;经典Wnt信号通路在下颌下腺分支形态发生过程中作用与机制的初步研究[A];第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编[C];2018年
9 林泓域;Yimon Aye;;Wnt信号通路与Nrf2信号通路之间的微妙关系——靶向化学平台T-REX在氧化还原信号通路研究方面的应用[A];第十届全国化学生物学学术会议论文摘要集(墙报)[C];2017年
10 张丽琳;常娜;蒋伶活;;镉胁迫下MAPKs信号通路的应答机制初探[A];第九届中国模式真菌研讨会摘要集[C];2016年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王宝龙;低剂量铬暴露促进前列腺癌细胞增殖进展的机制探索[D];天津医科大学;2018年
2 胡奕;RACK1调控NF-κB信号通路在幽门螺杆菌感染致癌中的作用及机制[D];南昌大学;2019年
3 何颖;BMSCs恶性转化中基因表达谱和DNA甲基化谱关联分析及NOTCH信号通路的作用[D];南昌大学;2019年
4 陈玲丽;RhoA/ROCK信号通路在氟致小鼠智力损伤中的作用及其机制[D];山西农业大学;2018年
5 刘佳;miR-338-3p通过调控AKT信号通路抑制皮肤炎症及肺癌发展的研究[D];东北林业大学;2018年
6 张辉;Erythropoietin信号通路对成体大鼠脊髓内源性神经干细胞增殖分化作用的实验研究[D];安徽医科大学;2018年
7 吴慧;活性多肽的表达及功能研究[D];国防科学技术大学;2017年
8 韩晶晶;Nrf2信号通路在急性移植物抗宿主病中的作用及机制研究[D];苏州大学;2018年
9 朱建伟;MAPK/纤调蛋白信号通路在氧化应激介导慢性胰腺炎纤维化中的机制研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2018年
10 孙海涛;NF-κB P65通过Wnt信号通路调控HSCs活化的分子机制及鳖甲寡肽I-C-F-6的干预作用[D];南方医科大学;2018年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周婷;高糖诱导SHSY-5Y细胞过表达GIGYF1对IGF1R信号通路的影响[D];重庆医科大学;2019年
2 金莲花;LPS/TLR4信号通路对肝星状细胞活化及增殖的作用机制[D];延边大学;2019年
3 耿鹤;HA-CD44st-TGF-β信号通路对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响[D];蚌埠医学院;2019年
4 俞倩;Smo介导的Hedgehog信号通路以阶段特异性方式调控脊髓少突胶质细胞的发育[D];杭州师范大学;2019年
5 杨碧娟;新型菲啶类Wnt信号通路激动剂的设计合成和构效关系研究[D];云南大学;2018年
6 崔悦悦;白藜芦醇通过脂联素信号通路调节猪脂肪沉积的机制研究[D];广西大学;2019年
7 胡舒;卵形鲳鲹TLR3信号通路相关基因的克隆与表达分析[D];广西大学;2019年
8 张翔;乙型肝炎病毒相关蛋白介导Hedgehog信号通路的异常激活并促进肝细胞癌细胞的恶性表型[D];南昌大学;2019年
9 银臻;阻断SHH信号通路对MDS细胞增殖抑制与诱导凋亡的实验研究[D];新疆医科大学;2019年
10 尹训强;MiRNA靶向STAT信号通路调控DC分化在URSA中的作用与机制[D];济南大学;2019年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 白毅;mTOR信号通路为肿瘤治疗提供新靶点[N];中国医药报;2010年
2 记者 王丹;最强激光“照亮”药靶重要信号通路[N];健康报;2015年
3 ;完美实现信号通路间的自由切换[N];通信产业报;2008年
4 本报特约撰稿 樊平;肿瘤信号通路靶点研发线吸睛[N];医药经济报;2018年
5 衣晓峰 陈英云 记者 李丽云;结肠癌发生中新的信号通路找到[N];科技日报;2009年
6 东南大学附属中大医院 刘必成 李作林;从缺氧调适机制谈疾病的治疗[N];健康报;2019年
7 刘海英;美发现两种细胞信号通路互动机制[N];科技日报;2009年
8 衣晓峰;哈医大发现结肠癌发生中新的信号通路[N];中国医药报;2009年
9 记者 刘海英;英发现细胞信号通路新“刹车”蛋白[N];科技日报;2012年
10 中山大学肿瘤医院血液肿瘤科 吕跃 王华;难治性HL研究砥砺前行[N];医药经济报;2013年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978