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万寿菊根提取物对西瓜枯萎病的抑菌活性成分研究

宋炜  
【摘要】:本研究主要以对瓜类危害严重的西瓜枯萎病为研究对象,通过不同溶剂提取,薄板层析,柱层析,气相色谱(GC),气相色谱质谱联用(GC/MS)等手段对万寿菊根中抑菌活性成分进行了提取、分离和纯化,并对每一级成分进行生物活性追踪实验,逐步筛选,最后获得抑菌活性最大化合物。结果如下: 1.对万寿菊根采用不同溶剂结合超声、水浴进行提取,各提取物分别做抑菌实验,结果表明各提取物对西瓜枯萎病菌菌丝生长有不同程度的抑制作用;其中以乙醚提取物抑菌效果最佳,将对其做进一步分离、纯化:氯仿提取物质量最大,NaOH提取物颜色与其它差别较大,且无抑菌作用。 2.将乙醚提取物进行柱层析分离纯化;首先根据溶剂极性的不同按不同比例配成洗脱剂,用薄板对不同配比的洗脱剂进行展层选择,最终选定氯仿作洗脱剂;乙醚提取物经氯仿柱层析分离得流份四个,分别做抑菌实验,其中流份Ⅲ活性最大。根据王新国对万寿菊中化学成分的研究报道,对流份Ⅲ进行了生物碱、精油、黄酮、甙类物质的性质实验和提取率测定,并结合抑菌实验最终确定流份Ⅲ主要成分为精油类物质,并对其做GC/MS分析。 3.将流份Ⅲ按经典精油化学分离方法进行分离,得六类成分,分别做抑菌实验,确定其中油层成分活性最大;继而对其进行柱层析分离,结合薄板检测得三个成分,抑菌结果表明成分Ⅱ活性最大,对其做GC分析,结合上述GC/MS图谱进行对比,得最大活性成分化合物结构。 4.对流份Ⅲ做其它常见致病菌抑菌实验和孢子萌发测定。结合前面的实验结果,表明万寿菊根提取物中抑菌活性主要成分为精油类物质;提取物中含有多种对西瓜枯萎病菌丝生长和孢子萌发有抑制作用的成分且对镰刀菌枯萎病具有较为广谱的抑制作用。


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