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丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用及对P16和CyclinD1表达的影响

董美娥  
【摘要】:研究目的 建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)丙氨瑞林(Alarelin)干预对移植瘤的生长、P16及CyclinD1表达的影响,并探讨GnRH- A可能的作用机制。 研究方法 体外培养人子宫内膜癌HEC-1B细胞,建立人子宫内膜癌动物模型。造模成功后将32只裸鼠随即分为四组,即对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。对照组给予0.2ml的生理盐水,低、中、高剂量组分别给予15、30、60 ug/kg的丙氨瑞林0.2ml,肌肉注射。每只每日给药一次,连续给药6周。干预过程中严密观察肿瘤生长及裸鼠情况,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。6周后处死裸鼠,完整取出移植瘤组织,计算抑瘤率,光学显微镜下观察肿瘤组织形态学变化,免疫组化法(PV)检测肿瘤组织中P16和CyclinD1蛋白的表达。 结果 1.瘤细胞接种裸鼠约一周,可见其右上肢近腋窝处皮下有一不规则肿物,直径约0.4cm,呈结节状,有完整包膜,质硬,局部活动度大。接种后裸鼠生长良好,精神、活动正常,饮食及大小便无明显变化。 2.治疗结束后,对照组移植瘤体积为697.50±339.93mm3,低、中、高剂量组分别为552.47±289.33 mm3、457.97±267.51 mm3、423.87±268.29 mm3,不同剂量丙氨瑞林组体积相对对照组均有减小,差异有统计学意义(P0.05)。低、中、高剂量组的抑瘤率分别为20.79%、34.34%、39.23%,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),低、中剂量组与高剂量组比较差异有统计学意义(P0.05),中剂量组与高剂量组比较差异不显著(P=0.272)。 3.光镜下见对照组瘤细胞密集,呈片状分布,细胞有明显异型性,核大深染,染色质呈团状,有明显核仁,胞质丰富,可见较多核分裂像,间质较少;丙氨瑞林组瘤细胞排列较对照组稀疏,可见大片无结构坏死区,细胞的异型性小,瘤细胞核深染、固缩。各组间大体观察没有明显差异。 4.免疫组化结果显示,随着丙氨瑞林剂量的不断增加,肿瘤组织中P16蛋白表达逐渐增强,CyclinD1蛋白表达逐渐减弱,组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。 结论 1.不同浓度的丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长具有不同的抑制作用,且在一定范围内呈一定的剂量依赖性。 2.丙氨瑞林可使移植瘤组织形态发生明显的改变。 3.丙氨瑞林对裸鼠皮下移植瘤的抑制作用可能是通过上调P16和下调CyclinD1蛋白的表达,抑制细胞增殖实现的。


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