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苯并“a”芘对断乳大鼠学习记忆及海马NMDAR2B、BDNF、CREB和P300表达的影响

程继文  
【摘要】:目的:观察苯并[a]芘(B[a]P)致断乳大鼠病理组织学以及神经行为的变化,探讨不同剂量苯并[a]芘对断乳大鼠学习记忆能力的影响及其机制。 方法:取40只健康SD初断乳大鼠(28天,体重50~55 g),按体重随机分为5组,每组8只,分组:空白对照组(腹腔注射生理盐水)、溶剂对照组(腹腔注射植物油)、3个染毒组(B[a]P浓度分别为5、10和20 mg / kg体重)。隔日腹腔注射,连续染毒一个月后Morris水迷宫试验,测定动物的学习记忆能力,而后断头处死断乳大鼠,取脑,观察断乳大鼠组织学变化。用免疫组织化学法检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR2B亚基(NMDAR2B)、脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB1)、CREB结合蛋白(CBP/P300)在大鼠海马区的表达。 结果:(1)Morris水迷宫试验结果显示:在定位导航试验中,高剂量组逃避潜伏期显著增加(P﹤0.01);在空间搜索实验中,随染毒剂量的增加,原平台现象停留时间呈递减趋势,但各组之间相比差异无统计学意义(P0.05),高剂量组跨台次数减少(P0.05)。(2)病理组织学结果:常规HE染色光镜观察到,对照组神经细胞排列整齐,随着苯并[a]芘剂量的增高,细胞排列渐松散,高剂量组可见有散在神经元体积缩小,未见凋亡特征性的变化。尼氏体染色结果显示:高剂量组大鼠海马区神经元的胞体和树突内含有颗粒状蓝染物质,可见少许胞体和树突内含有颗粒状蓝染物质溶解或消失(尼氏体溶解现象)。(3)免疫组织化学染色结果:镜下可见各组大鼠海马均有大量免疫反应阳性神经元,CREB1和NMDAR2B阳性反应定位于细胞胞膜上,呈棕黄色,并可见随着染毒剂量的加大,免疫阳性表达呈递减趋势,高剂量组与对照组相比,差异有统计学意义(P﹤0.01)。BDNF和P300阳性反应主要定位于细胞胞浆中,呈棕黄色。随着染毒剂量的加大,BDNF灰度值除低剂量组外也呈递减趋势,高剂量组与对照组、低剂量组相比差异均有统计学意义(P﹤0.05),低剂量组大鼠海马区BDNF灰度值高于对照组,但二者相比差异无统计学意义(P0.05)。P300免疫阳性反应呈递增趋势的现象,低、中量组与对照组相比,差异亦具有统计学意义(P﹤0.01)。结论:苯并[a]芘可致断乳大鼠学习记忆能力发生改变,且随剂量的增加而变化越明显。苯并[a]芘致大鼠学习记忆损伤的病理机制可能与大鼠海马区NMDAR2B、BDNF、CREB1的低表达有关。P300在苯并芘致学习记忆损伤过程中可能发挥保护作用,不发挥乙酰化酶的作用。


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