急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究

【摘要】：目的：探讨急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究及其临床意义。 方法：采用聚合酶链式反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术分析30例急性白血病和30例淋巴瘤患者线粒体基因组的D-loop区HV-1和HV-2两个高变区并测序，结果与剑桥标准序列（rCRS）、mtDB数据库中国汉族人mtDNA序列和同一患者口腔上皮正常组织的序列进行对比，分析其突变情况，采用SPSS11.5统计学软件对数据进行分析。 结果：1.急性白血病组 （1）30例急性白血病患者，共有20例（66.67%）患者D-loop区发生突变，共检测到59个突变，涉及25个基因位点，新发现突变位点nt16209TC。存在4个不稳定的微卫星结构,即D310（nt303-315C_7TC_5)、D16184（nt10184-10193C_5TC_4)、nt203-208(GT)_3、nt16388-16391 G_4。一般预后组共有突变位点nt150CT、D310C_7TC_5(C_8TC_6) C_7TC_6、C_9TC_5、D16184C_5TC_4C_(10)、C_(11)，不良预后组共有突变位点nt152TC、nt16311 TC、nt16519TC。 （2）未治疗组（UT）、部分缓解组（PR）和完全缓解组（CR）3组的突变率分别为2.19×10~(-3)±0.07×10~(-3)、4.37×10~(-3)±1.83×10~(-3)、2.87×10~(-3)±0.81×10~(-3)，单因素方差分析F=5.421,P=0.0150.05；进一步分析LSD-t检验如下：P_(UT-PR)=0.0050.05，差异有统计学意义，P_(PR-CR)=0.0310.05，差异有统计学意义，P_(UT-CR)=0.2990.05，差异无统计学意义。 （3）一般预后组和不良预后组对比：突变率分别为3.01×10~(-3)±1.24×10~(-3)，3.55×10~(-3)±1.73×10~(-3)，t=-0.825，p=0.4200.05，差异无统计学意义。 （4）突变率与年龄和性别无关。 2.淋巴瘤组 （1）30例淋巴瘤患者，共有14例（46.67%）患者D-loop区发生突变，共检测到54个突变，涉及31个基因位点,发现8个不稳定的微卫星结构，即D310（nt303-315C_7TC_5)、D16184（nt10184-10193C_5TC_4)、nt 16259-16262 C4、nt 16388-16391 G_4、nt 16470-16474 G5、nt203-208(GT)_3、nt 233-241(TAA)3、nt 353-356 C4。 （2）未治疗组（UT）、部分缓解组（PR）和完全缓解组（CR）3组的突变率分别为3.28×10~(-3)±1.55×10~(-3)、6.12×10~(-3)±2.52×10~(-3)、3.28×10~(-3)×10~(-3)±0.77×10~(-3)，单因素方差分析F=4.093,P=0.0470.05；进一步分析LSD-t检验如下：P_(UT-PR)=0.0370.05，差异有统计学意义，P_(PR-CR)=0.0280.05，差异有统计学意义，P_(UT-CR)=1.000.05，差异无统计学意义。 （3）一般预后组和难治复发组比较：突变率分别为4.26×10~(-3)±1.82×10~(-3)，4.37×10~(-3)±3.22×10~(-3)，t=0.82，p=0.9360.05，差异无统计学意义。 （4）突变率与年龄和性别无关。 结论：1.急性白血病组和淋巴瘤组线粒体基因组D-loop区中均存在较高的突变率,具有较强的不稳定性。 2.化疗可能增强D-loop区基因的不稳定性。 3. D-loop区突变率可能与急性白血病、淋巴瘤病情缓解而降低。 4.nt150CT、D310C_7TC_5(C_8TC_6) C_7TC_6、C_9TC_5、D16184C5TC4C_(10)、C_(11)、nt152TC、nt16311 TC、nt16519 TC可能与急性白血病预后有关。