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创伤性脑损伤大鼠乙酰胆碱、脑源性神经生长因子表达变化的研究

李启华  
【摘要】:目的建立创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI )模型,探讨创伤性脑损伤大鼠乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)和脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)变化及其意义。 方法健康雄性SD大鼠192只,体重250-300g,随机分为脑损伤组(简称TBI组,n=144只)及对照组(n=48只)。TBI组再随机化分为:轻、中、重度颅脑损伤组3组(各组48只)。各TBI组及对照组,皆随机化分为15min、0.5、1、3、6、12、24、48h各8个亚组,每亚组均为6只。参照FEENEY’S法,采用自制自由落体打击装置,对轻度、中度、重度组分别给予200g.cm、600g.cm和1000g.cm打击力致伤,制作轻度、中度、重度TBI模型。各TBI组及对照组于损伤后相应观察时间点处死,取海马、皮质等脑组织。用酶联免疫吸附ELISA法检测Ach、BDNF在不同脑组织中的含量,HE染色观察TBI中组织病理改变。 结果(1)TBI中Ach与BDNF海马含量变化呈明显正相关(r_s=0.340,P0.01), Ach与BDNF皮质含量变化亦呈正相关(r_s=0.311,P0.01)。颅脑损伤后,脑组织Ach含量先立刻升高,随之迅速下降,降至正常水平以下;BDNF变化规律是损伤后缓慢升高,随之缓慢下降。不同程度TBI组及对照组之间Ach、BDNF脑组织总含量不相同,差异具有统计学意义(P0.01)。TBI相同损伤程度中不同观察时间点之间脑组织ACH、BDNF含量不同,差异具有统计学意义(P0.01)。(2)光镜观察显示:轻度颅脑损伤组:局灶性脑组织表面血管破裂致出血,血液流入蛛网膜下腔,大鼠脑皮质分子层,外颗粒层等部位受挫伤,其周边仍可见神经细胞存在,细胞质伊红染色程度加深;神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞等周边间隙加大。中度颅脑损伤组:顶叶部位脑组织表面血管破裂致出血,血液流入蛛网膜下腔,大鼠脑皮质分子层,外颗粒层,外锥体细胞层,内颗粒层,内锥体细胞层等处受挫伤,伴有不同程度的出血,变性、坏死的神经元增多。重度颅脑损伤组:顶叶脑组织表面血管破裂致出血,血液流入蛛网膜下腔,有些可出现硬膜下血肿;挫伤灶除可见于大鼠脑皮质分子层,外颗粒层,外锥体细胞层,内颗粒层,内锥体细胞层,多形细胞层等,还见于白质深处的胼胝体、海马等。变性、坏死的神经元进一步增多。 结论TBI中ACH与BDNF在脑组织含量变化呈正相关,且与损伤程度有关,通过ACH与BDNF脑组织含量可以间接反映TBI病变及损伤程度,有可能为临床脑损伤的治疗、损伤程度及预后的判断提供新的方法。


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