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银杏叶提取物诱导U251胶质瘤细胞的凋亡及其机制的研究

李晓冬  
【摘要】:目的:研究银杏叶提取物对U251胶质瘤细胞的影响及机制. 方法:使用不同浓度(60、100、150、200、250mg/L)的银杏叶提取物干预U251胶质瘤细胞后,CCK8检测12、24、48h的u251胶质瘤的增殖状况,Hoechst33342试剂检测胶质瘤凋亡形态与用流式双染法来检测银杏叶提取物对U251细胞的影响以及免疫组化测Bcl-2表达情况。用SPSS13.0软件进行统计学数据处理,组间比较采用方差分析。 结果:1.CCK8检测法显示银杏叶提取物(100、150、200、250mg/L)作用12、24、48小时均可抑制U251细胞的增殖,药物浓度升高及时间延长对u251胶质瘤细胞的抑制率也升高,相比对照组差异均具有统计义意(P0.01),除去60mg/L组各组间的差异比较也有统计义意(P0.05),然而60mg/L银杏叶提取物作用12、24、48h对U251细胞的增殖无明显影响并且相比对照组没有统计义意(P005);2.银杏叶提取物处理组均可见荧光染色的胶质瘤细胞核的强染色荧光细胞团和细胞核破裂典型的荧光下细胞凋亡的特征,并且随着干预药物浓度的增加,胶质瘤细胞的凋亡形态改变越加显著,而阴性的对照与溶媒组细胞大小均匀且为淡蓝的微弱荧光显像;3.银杏叶提取物100、150、200、250mg/L凋亡率与对照组比较差异有统计学义意(P001)。呈现一定的剂量-依赖的关系60mg/L作用后没有影响。4.不同浓度银杏叶提取物作用24h后,经SP法染色并显微镜观察,在u251胶质瘤中Bcl-2表达于胞浆内,镜下胶质瘤的胞浆内表达染色为棕黄色的,Bcl-2在细胞内表达的量越多镜下显示颜色就愈加重,增加药物的浓度后胶质瘤内染色表达愈加浅,bcl-2在胞内的表达愈少,说明其能够改变U251细胞凋亡基因的相关蛋白的表达。 结论银杏叶提取物下调Bcl-2基因的表达水平使肿瘤细胞凋亡,是其抗肿瘤的途径,给银杏叶提取物抗肿瘤的临床使用提供了依据。


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