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急性白血病NO、NOS、VEGF、IL-6、IFN-γ、血小板膜糖蛋白及RP水平研究及临床意义

阴怀清  
【摘要】:目的 了解不同类型急性白血病(acute leukemia,AL)在不同病期一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、血小板膜糖蛋白(platelet glycoproteins,p-GPs)及网织血小板(reticulated platelets,RP)水平变化规律,并探讨不同病期急性白血病NO、NOS与VEGF之间、IL-6与IFN-γ之间、以及RP与的网织血小板绝对计数(reticulated platelets count,RPC)之间的相关关系,以期为临床开展抗血管新生及细胞因子等细胞生物学方法治疗白血病提供一定依据。 方法 (1)采用硝酸还原酶法分别测定73例急性白血病患者初发期及缓解期骨髓及血清的NO、NOS水平。(2)应用双夹心ELISA方法检测其初发期及缓解期外周血及骨髓的VEGF水平。(3)采用流式细胞仪活细胞直接/间接免疫荧光法测定20例ALL患者初发期及缓解期静脉血经培养和刺激后淋巴细胞内IL-6及IFN-γ的表达水平。(4)采用流式细胞仪活细胞直接/间接免疫荧光法测定83例急性白血病患者初发期及缓解期静脉血富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)CD_(41)、CD_(42)、CD_(61)、CD_(62p)、RP表达水平,并根据患者不同病期测定RP时的静脉血血小板计数得出其相应的RPC。 结果 (1)急性白血病患者初发期及缓解期骨髓及血清VEGF、NO、NOS 山1穿医科大学 博士论文2003(中文摘要) 水平比较:急性白血病患者初发及缓解期骨髓NO、NOS及VEGF水平均 较正常对照组增高,三组之间统计学差异具有高度显著性(F test,all P0.001)。缓解期与初发期相比,除骨髓NOS下降无差异外,骨髓NO及 VEGF在缓解期均较初发期明显下降(P分别0.05及0.01)。急性白血病患 者初发及缓解期血清NO、NOS及vEGF水平均较正常对照组增高,三组 之间具有高度显著性统计学差异(F test,allP0.001)。缓解期与初发期相 比,血清NO、NOS及VEGF水平均下降。(2)急性白血病患者不同标本 VEGF、NO、NOS之间相关性:急性白血病患者血清NO浓度与VEGF水 平呈明显」卜相关关系(r=0.68,P0.01),患者血清vEGF与骨髓vEGF浓度 呈明显的I卜相关关系(:=0.87,P0.01);血清NO与血清vEGF水平呈明 显的正相关关系(r=0.40,P0.01);骨髓NO与骨髓vEGF水平亦呈明显 的正相关关系(r=O56,P0.01)。(3)不同亚型急性白血一病患者不同病期骨 髓及血清VEGF、NO、NOS水平比较:ALL患者缓解期NO、NOS及VEGF 水平较初发期明显下降,经统计学处理差异具有高度显著性及显著性意义 (P分别0.01及0.05);ANLL(除外M3)患者除骨髓及血清NoS水平在 缓解期与初发期比较差异无显著性外,其骨髓及血清NO及vEGF水平缓 解期均较初发期明显一下降(P分别0.05及0.01);而ANLL一M3患者骨髓 及血清NO、NOS及VEGF水平在缓解期一与初发期比较差异均无显著性(P 均0.05)。(4)ALL患者不同病期静脉血淋巴细胞内IL一6及IFN一Y表达水平 比较:ALL患者在初发期其静脉血淋巴细胞内IL一6表达水平较正常对照组 明显升一高(P0.01),而静脉血.淋巴细胞内IFN一Y表达水平较正常对照组有 所下降(P0.01);但经化疗获得缓解后,AI了L患者静脉血淋巴细胞内IL一6 表达水平较初发期明显降低(P0.01),却仍较正常对照组升高(P0.01), 而静脉血淋巴细胞内IFN一Y表达水平较初发期明显升高(P001),且较正 二 山1穿医科口丈学 博士论文2003(中文摘要) 常对照组也明显升高,经统计一学处理差异具有高度显著性意义(P0.01)。 (5)ALL患者不同病期静脉血淋巴细胞内儿一6及IFN一丫表达水平相关关系: ALL患者在不同病期静脉血淋巴细胞内IL一6与IFN一Y表达呈明显的负相关 关系(r=一0.3 16,P0.05),即初发期ALL患者静脉血淋巴细胞内IL一6表 达明显较正常对照组升高,而淋巴细胞内IFN一Y表达较正常对一照组降低; 在缓解期时,ALL患者静脉血淋巴细胞内IL一6表达明显下降,而IFN一丫 表达则反而升高。(6)不同病期急性白血病患者血小板膜糖蛋白及RP表达 水平:急性白血病患者在初发病期静脉血血小板糖蛋自表达水平较正常对 照组明显下降(Co41,eo42,eo61:P均0.01,eo62p,p0.05),网织血小板 (即)百分比初发病期较正常对照组明显升高(P0.01),而网织血小板绝对 值(RPC)较对照组明显下降(P0.01);当经化疗获得缓解时,急性白血病患 者血小板糖蛋白表达也恢复正常,而RP及RPC虽仍略高于对照组,但无 统计学差异(P均0.05)。(7)不同类型急性白血病患者在不同病期血小板膜 糖蛋白、RP表达水j卜比较:ANLL(除外M3)患者其缓解期血小板膜糖蛋 白表达水平明显较t}J发期上升(CD41,Co42,Co62p,P0.05;en61,P0.01), RP百分比较初发期明显下降(P0.01),而RPC仍明显高于初发期(P0.05); ANLL一M3患者缓解期血小板膜糖蛋白表达水平明显较初发期上升(CD41, CD42,CD61,P0.05;CD62p,P001),Rl)一1不「分比较初发期明显下降 (P0 .01),而RPC则无明显变化(P0.05):ALL患者缓解期静脉血血小板 膜糖蛋白表达及RpC较t)J发期明显增高(CD41,eo61,Co62p,RPC, p0.01:


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