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一氧化氮抑制AngⅡ诱导新生大鼠心肌细胞肥大反应的机制

吉丽敏  
【摘要】:目的:观察一氧化氮(nitric xoide, NO)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的培养心肌细胞肥大反应中的作用及其信号转导途径,重点探讨蛋白激酶C(PKC)在NO抑制AngⅡ诱导心肌细胞肥大反应中的作用。 方法:建立原代培养的新生大鼠心肌细胞肥大模型,测量心肌细胞表面积、蛋白质含量、~3H-亮氨酸(~2H-Leu)掺入量以及心房钠利尿因子(ANF)mRNA的表达等指标来评定心肌细胞肥大。 结果:1.与对照组相比,AngⅡ显著地增加心肌细胞表面积、蛋白质含量、~2H-Leu掺入量并呈量效关系;2.AngⅡ受体拮抗剂(Sar)、百日咳毒素(PTX)和PKC抑制剂(Stau)可抑制AngⅡ增加心肌细胞~3H-Leu掺入的作用,而它们本身对~3H-Leu掺入无明显影响。3.NO前体L-精氨酸(L-Arg)明显抑制心肌细胞~3H-Leu掺入速率和ANF mRNA的表达,并明显减弱AngⅡ增加~3H-Leu掺入的效应;L-Arg的这些效应均可被NOS抑制剂N~G-硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)所阻断。4.PKC激动剂佛波脂(PMA)使心肌细胞的~3H-Leu掺入量、ANF mRNA表达明显增加;L-Arg可减弱PMA的增加效应;同时加入L-NAME则使PMA的增加效应进一步增强,提示PKC可能通过抑制NOS活性,减少内源性NO的生成,从而诱导心肌肥大反应。在培养液中预先加入较高剂量的L-NAME,再加入PMA,~3H-Leu掺入量没有进一步增加。5.NO供体硝普钠(SNP)能明显减少心肌细胞ANF mRNA的表达;并可以使AngⅡ增加ANF mRNA表达的效应明显减弱;Stau可抑制AngⅡ增加ANF mRNA表达的作用。 结论:AngⅡ具有诱导心肌肥大的作用且呈量效关系,此作用通过AngⅡ受体介导;AngⅡ的这种肥大作用可能部分依赖于PTX敏感的G蛋白,并由PKC介导;内、外源性NO明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应,此作用可能有PKC的参与;PKC通过抑制NOS活性参与NO抑制AngⅡ诱导的心肌肥大反应。


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