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轻微肝性脑病大鼠海马内Glu、GluR1、GABA及GABAR_A表达的实验研究

张丽  
【摘要】:目的:1.初步建立轻微肝性脑病(MHE)的动物模型;2.观察 MHE 模型组及对照组海马谷氨酸(Glu)、谷氨酸受体 GluR1、r-氨基丁酸(GABA)及其受体 GABARA的表达;3.探讨 Glu、GluR1、GABA 及 GABARA在 MHE发病机制中的作用,为使用相关药物治疗 MHE 提供实验依据。 方法:实验开始前所有动物均进行 Morris 水迷宫测试(MWM)和脑干听觉诱发电位(BAEP)测试,之后随机抽出 9 只动物作为对照组,剩余动物复制四氯化碳(CCL4 )高脂低蛋白复合因素造成的实验性肝硬化模型,实验第 9 周(肝硬化晚期)用 Morris 水迷宫和 BAEP 测试动物的学习、记忆、空间认知能力,根据测试结果选出二者之一为阳性的动物再进行脑电图(EEG)测试,无典型肝性脑病的慢波者为 MHE 大鼠 ,MHE 模型即建立。接着在 MHE 大鼠中完全随机抽出 12 只大鼠为 MHE 组,剩余 9 只停用 CCL4 并普通饲料、自来水喂养四周(此时肝病理证实为重度肝脂变),为肝脂肪变组;第 13 周第三次测试肝脂变组大鼠的 Morris 水迷宫和 BAEP,接着测定模型组、对照组及肝脂肪变组腹主动脉血氨和内毒素值,取肝左叶观察病理改变,并用免疫组化的方法观察各组大鼠海马 Glu、GluR1、GABA 及 GABARA 的表达。 结果:1).与对照组大鼠比较,造模组第九周水迷宫测试逃避潜伏期明显延长,以潜伏期延长超过正常 x +2.5s 为标准,本实验有 16/30(53.3%)只大鼠水迷宫潜伏期明显延长;2).造模第九周,造模组大鼠 BAEP 的潜伏期(PL)明显延长,据 BAEP 结果有 19/30(63.3%)只大鼠的 BAEP 的 PL至少一个波延长;综合两项检测结果,MHE 总体发生率为 21/30(70.0%);3).MHE 模型组血氨浓度明显高于正常对照组,组间比较有显著性差异(P0.01);肝脂变组大鼠血氨浓度略高于对照组,但组间比较无显著性差异(P0.05);4)MHE 模型组血清内毒素含量明显高于正常对照组,组间比较有显著性差异(P0.01); 肝脂变组大鼠血清内毒素浓度略高于对照组,但组间比较无显著性差异(P0.05);5).MHE 模型组大鼠海马内 Glu 及 GluR1


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