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四个X-STR基因座荧光复合扩增体系的建立及其法医遗传学研究

李惠芬  
【摘要】: 目的:本课题旨在建立四个x染色体特异性短串联重复基因座DXS9902、DXS6800、DXS6799和DXS7132的荧光复合扩增体系并对其进行法医学实用性研究;利用所建立的体系调查北京汉族人群中这四个基因座的遗传多念性,为DNA数据库建立和群体遗传学提供基础数据。 方法:对国内外文献中查到的8个已有报道的X-STR基因座进行筛选,从中获得四个多态性好、个人识别率高,扩增产物长度片段有区别的基因座,利用传统的复合扩增法,ABI PRISM 3100毛细管电泳进行荧光标记复合扩增的研究,并对复合扩增体系的灵敏度和准确度,不同扩增参数下复合扩增的效果进行研究及法庭科学有效性验证,并应用于实际案件;用所建立的体系对北京汉族200名无关男性个体及200名无关女性个体进行群体遗传学调查。 结果:建立了DXS9902、DXS6800、DXS6799和DXS7132的荧光标记复合扩增体系,该体系条件稳定,结果准确可靠。法庭科学有效性研究发现,应用该体系可获得准确分型结果的最小模板量为0.25 ng,对猪,牛,羊,鸡,鱼和鸭等常见动物检测均未得到特异性分型结果,同一个体血,骨骼肌,心肌,肝脏,肺脏和脑等组织分型结果一致。对实际案件中血痕、软骨,烟蒂,精斑,毛发等常见检材进行检测,均得到可靠分型结果。北京汉族人群调查得到四个基因座的基因频率(0.002—0.817);个人识别率(0.526-0.886);非父排除率(0.32-0.691);四个基因座独立性分析,未检测到连锁不平衡。 结论:DXS9902、DXS6800、DXS6799和DXS7132的荧光标记复合扩增体系,分型结果稳定可靠,具有高度准确性,高灵敏度,种属特异性、组织同一性、检材适应性;该方法简便、高效,易于掌握,便于推广。群体遗传学调查表明,该系统个体识别能力较强,非父排除率较高,基因座之间具有相对独立性,适用于法医学个人识别和亲子鉴定。


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