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甲氰菊酯法医毒物动力学研究

张凯  
【摘要】: 目的: 1.建立家兔甲氰菊酯灌胃染毒死后弥散模型; 2.建立犬甲氰菊酯灌胃染毒模型; 3.改进甲氰菊酯气相色谱检测,建立其GC-ECD、气相色谱/质谱联用检测方法; 4.研究甲氰菊酯在家兔体内的毒物动力学、死后弥散及其在犬体内的分布。 方法: 1.甲氰菊酯在家兔体内的毒物动力学研究取家兔8只,随机分为实验组(6只),分别经口灌胃染毒1/2 LD_(50)甲氰菊酯农药,于15、30、60、120、240和360分钟抽取动脉血1毫升,样品经酸处理后,三氯甲烷萃取,气相色谱和气相色谱.质谱联用检测,根据甲氰菊酯的特征离子峰、保留时间定性与内标法、工作曲线法定量。 2.甲氰菊酯在犬体内的分布研究取犬8只,随机分为实验组(5只),分别经口灌胃染毒8LD_(50)甲氰菊酯农药,2.5小时后将犬处死,迅速解剖动物,取全部心、肝、脾、肺、肾、脑、胃壁、心血、胆汁、胸肌、右下肢肌肉等组织,放置于-20℃冰箱内保存待检,样品经酸处理后,三氯甲烷萃取,气相色谱和气相色谱.质谱联用检测,根据甲氰菊酯的特征离子峰、保留时间定性与内标法、工作曲线法定量,研究犬体内的甲氰菊酯分布情况。 3.甲氰菊酯在家兔体内的死后弥散研究取家兔39只,分为死后弥散组、温度影响组和剂量影响组。死后弥散组:21只,将家兔处死,1小时后,经口灌胃染毒2 LD_(50)甲氰菊酯农药,置于常温环境下,分别于3、6、12、24、48、72和96小时各解剖3只家兔,检测比较家兔脏器中甲氰菊酯的含量;温度影响组:9只,将家兔处死,1小时后经口灌胃染毒2LD_(50)甲氰菊酯农药,每3只置于-20℃、4℃和常温环境下72小时,检测比较家兔脏器中甲氰菊酯的含量;剂量影响组:9只,将家兔处死,1小时后,每3只家兔分别经口灌胃染毒1/2 LD_(50)、2LD_(50)和4 LD_(50)甲氰菊酯农药,置于常温环境下72小时,检测比较家兔脏器中甲氰菊酯的含量。 结果: 1.甲氰菊酯在家兔体内的毒物动力学符合一级动力学、一级吸收、一室开放模型,吸收相和消除相半衰期分别为22分钟和287分钟。 2.犬8LD_(50)剂量甲氰菊酯灌胃染毒后0.95±0.72小时出现大小便失禁,痉挛,角膜反射减弱、呼吸缓慢,心率降低等中毒症状:染毒后2.5h犬体内甲氰菊酯的平均含量从高到低依次为:胃、肝、心血、心、脾、脑、肾、尿、肺、胸肌、右下肢肌肉、玻璃体、胆汁。 3.家兔处死后1小时2LD_(50)甲氰菊酯灌胃染毒3小时后,心血、心、脾、尿和肺中均检出甲氰菊酯,6、12、24、48、72和96小时后各脏器和体液中均检出甲氰菊酯;死后染毒72小时,家兔脏器中甲氰菊酯的含量染毒剂量增大(1/2 LD_(50)、2LD_(50)和4 LD_(50))各脏器中甲氰菊酯检出浓度增加:死后染毒.20℃保存72小时,脑、肝、肾、心、肺、脾中检出甲氰菊酯,胸肌、右下肢肌肉、心血、尿、玻璃体、胆汁中未检出甲氰菊酯;死后染毒4℃保存72小时,仅玻璃体液和胆汁中未检出甲氰菊酯。 4.本研究建立的气相色谱检测生物样本中甲氰菊酯的方法,达到良好的分离,线性范围为2-120μg/g或μg/ml,最低检出浓度是0.013μg/g或μg/ml,回收率均在80%以上。 结论: 1.本研究建立的家兔甲氰菊酯灌胃染毒及死后弥散模型和犬甲氰菊酯灌胃染毒模型可应用于甲氰菊酯意外死亡和中毒案件的法医学研究。 2.本研究建立了甲氰菊酯的GC-ECD检测方法,可应用于甲氰菊酯中毒死亡的法医学检验和法医毒物动力学研究。 3.犬8 LD_(50)染毒后2.5小时犬体内甲氰菊酯的平均含量从高到低依次为:胃、肝、血、心、脾、脑、肾、尿、肺、胸肌、右下肢、玻璃体、胆汁。 4.甲氰菊酯在家兔体内可发生死后弥散,可能与甲氰菊酯本身理化性质、染毒剂量、毒物入体方式、死后给药时间、尸体保存时间和温度、弥散距离、尸体姿势有关。 5.甲氰菊酯中毒死亡法医学鉴定中,除提取胃内容物、肝脏、心血等常见检材外,还应采取肾、脾、脑等组织进行全面的定性和定量分析,并充分考虑药物剂量、死亡时间,尸体所处环境、体内微生物等影响因素,结合临床表现、病理报告等进行综合分析,为甲氰菊酯误服、中毒死亡案件和死后灌毒案件的甄别提供科学、客观的依据。


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