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神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织Fas及FasL表达的影响

张素芬  
【摘要】: 目的:新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy HIE)是新生儿常见且致残率较高的疾病,常引起新生儿死亡或其后的神经系统发育障碍,本课题主要研究新生大鼠缺血缺氧脑损伤后,用神经生长因子(nerve growth factor, NGF)干预后脑组织Fas及Fas-L的变化,探讨神经生长因子的脑保护作用的可能机制之一为减少Fas及Fas-L的表达,为临床上治疗新生儿缺氧缺血性脑病开辟新的途径。 方法:新生7天Wistar乳鼠120只随机分为3组(n=40):A组(假手术组),B组(缺血缺氧组),C组(缺血缺氧+NGF干预组)。每组根据处死时间不同又分为5个亚组:6小时组,12小时组,24小时组,48小时组,72小时组,每组各8只。建立HIBD模型,C组在缺血缺氧后即刻给予腹腔注射NGF(50μg/KG/d),每日一次,连续三天。各组在不同的时间点取脑组织,假手术组也在相应时间点取脑组织,石蜡切片行HE染色光镜下观察左侧脑组织病理变化,并用免疫组化法测定Fas及FasL含量。 结果:(1)新生大鼠在缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)后出现不同程度的行为异常。(2)HIBD模型组在HIBD后各时间点肉眼观脑组织大体形态出现不同程度的异常改变,而NGF治疗组各时间点脑组织大体形态基本正常。(3)HE染色:假手术组各时间点脑组织细胞层次清楚、细胞形态正常;HIBD模型组在HIBD后6h、12h出现不同程度的神经细胞水肿、变性,24h、48h神经细胞出现不同程度的坏死,细胞核碎裂、溶解,72小时神经元坏死明显,胶质细胞增生明显,病灶中心可见核固缩和核碎裂。NGF治疗组各时间点脑组织病理变化较HIBD模型组明显减轻,细胞排列尚规则。(4)Fas和FasL的表达:Fas和FasL阳性表达均呈棕黄色细颗粒沉积,阳性细胞可表达于大脑皮层和海马,阳性着色主要位于神经细胞胞浆。假手术组各时间点脑组织均无明显Fas及FasL阳性表达;HIBD模型组脑组织Fas及FasL阳性表达在HIBD后逐渐增加,均于24-48h达高峰,以后逐渐下降,不同时间点比较,Fas, FasL阳性表达差异均有统计学意义(P0.01),与假手术组相比,各时间点HIBD模型组Fas, FasL阳性表达均明显增加,差异均有统计学意义(P0.01);NGF治疗组各时间点脑组织均可见明显的Fas, FasL阳性表达,与HIBD模型组各时间点比较Fas, FasL表达均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论:(1)新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型建立后给予NGF可明显减轻脑组织的病理改变。(2)新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织Fas及FasL表达增加,且二者表达有显著的直线正相关关系,提示二者在缺氧缺血性脑损伤早期凋亡中有一定作用。(3)NGF可能通过降低新生大鼠HIBD后脑组织Fas及FasL的表达,减轻HIBD病理损伤过程,抑制神经细胞凋亡,从而对缺氧缺血引起的神经细胞损伤起到一定的保护作用。


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