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运用SELDI-TOF MS技术研究卵巢正常、良性、交界性及恶性组织蛋白间的差异表达

王福花  
【摘要】: [目的]卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤,主要是由于病变早期患者常无自觉症状,且卵巢位于盆腔深部,常规体检不易发现异常,导致70%以上的卵巢癌确诊时已属晚期,5年生存率只有15%左右,而早期卵巢癌(Ⅰ,Ⅱ期)的5年生存率超过90%,提示若能提高早期卵巢癌的诊断率,可明显改善患者预后。而表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry, SELDI-TOF MS)技术具有高通量、高灵敏度等特点,能对样品中蛋白质进行全景式分析,为肿瘤早期诊断提供了崭新的技术平台。本实验旨在应用SELDI-TOF MS技术探讨正常卵巢、良性、交界性、恶性卵巢肿瘤组织蛋白质指纹图谱间的差异,寻找差异表达蛋白,希望为卵巢癌的临床诊断和治疗奠定分子基础。 [方法]本实验应用SELDI-TOF MS技术,在实验条件优化的基础上,对15例原发性上皮性卵巢癌,5例卵巢交界性囊腺瘤,4例卵巢上皮性囊腺瘤,5例正常卵巢组织标本进行检测,用proteinChip software 3.2和Biomarker Wizard(BMW)软件对数据进行初步分析。 [结果] 1.经过实验条件的优化,确立了卵巢癌组织蛋白指纹图谱的最适条件。2.对4例卵巢上皮性囊腺瘤和5例正常卵巢组织蛋白指纹图谱比较,发现两组间无明显统计学意义。3.将良性与恶性卵巢肿瘤组织蛋白指纹图谱比较,发现两者在质荷比2-20Kda的范围内,存在9个在卵巢癌组织中明显高表达的峰(P0.01),分别为M/Z15112.15Da、M/Z15296.79Da、M/Z7560.78Da、M/Z16049.39Da、M/Z7682.06 Da、M/Z7932.30 Da、M/Z15851.32 Da、M/Z4619.68 Da和M/Z8052.10 Da; 4.将交界性分别与良、恶性卵巢肿瘤组织蛋白指纹图谱比较,发现差异不明显。但从蛋白指纹图谱上看,卵巢交界性肿瘤组织蛋白指纹图谱介于良、恶性卵巢肿瘤组织蛋白指纹图谱之间。 [结论]本研究应用SELDI-TOF MS技术,在实验条件优化的基础上检测了卵巢肿瘤组织的蛋白指纹图谱。经过分析,良、恶性卵巢肿瘤组织蛋白指纹图谱中,发现一些蛋白质在卵巢癌中高表达,提示这些高表达的蛋白可能是与卵巢癌发生发展有关的癌基因产物。而卵巢交界性肿瘤组织蛋白指纹图谱介于良、恶性卵巢肿瘤组织蛋白指纹图谱之间。提示在卵巢癌中高表达的蛋白在部分交界性肿瘤中已发生改变,其有可能参与了癌的早期发生过程,这为下一步寻找卵巢癌早期标志物奠定了基础。同时还提示图谱同卵巢恶性肿瘤相似的卵巢交界性肿瘤,疾病发展有可能更倾向于恶性,需要加以辅助化疗,这可能为交界性肿瘤术后辅助治疗提供分子依据。


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