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胰岛素样生长因子及其受体在绵羊早期胚胎及生殖系统中的表达

仓明  
【摘要】:胰岛素样生长因子家族是一类多功能细胞增殖调控因子,主要包括IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和两种受体IGF-Ⅰ R,IGF-ⅡR,这些因子在细胞的分化、增殖、胚胎生长发育及个体生长发育中具有重要的作用。为了研究绵羊早期胚胎发育过程中IGFs的表达模式及其在体外受精和体内受精胚胎中的表达差异,本研究首先克隆了绵羊IGFs各基因片段,与pGEM-T easy载体连接后测序鉴定。之后,通过荧光原位杂交、RT-PCR、免疫荧光染色与激光共聚焦扫描等实验方法在mRNA和蛋白两个水平上研究了IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR在绵羊卵母细胞和体外、体内不同发育阶段胚胎的表达。最后用免疫组织化学方法检测了绵羊生殖系统中这四种因子的表达情况。结果如下: 1、荧光原位杂交检测结果: IGF-Ⅰ mRNA在未成熟卵母细胞、体外成熟卵母细胞、2细胞、4细胞、8细胞胚胎和囊胚中均没有表达。体内卵母细胞及各期胚胎的检测结果和体外受精胚胎相同。 IGF-Ⅱ mRNA在绵羊体外成熟卵母细胞和体外受精胚胎的表达与体内


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