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玉米ZmCBL10的克隆及ZmCBL6和ZmCBL8的功能鉴定

李记园  
【摘要】:类钙调磷酸酶B蛋白(Calcineurin B-like proteins, CBLs)做为植物特有的Ca2+感受器,在植物响应各种非生物胁迫中发挥重要的调节作用。在玉米基因组中至少有9个CBL基因,本论文首次对其中ZmCBL10进行了克隆,并对ZmCBL6和ZmCBL8的抗逆功能进行了鉴定。主要研究结果如下: (1)采用RT-PCR方法克隆到ZmCBL10基因cDNA编码区,推测它由942bp组成,编码含有313个氨基酸残基的蛋白,其分子量为35.16KDa,等电点为5.14。 (2)将ZmCBL10cDNA编码区构建到植物表达载体p3300上,经菌液PCR和质粒酶切鉴定证明表达载体构建成功;然后将其转入根癌农杆菌GV3101,为进一步转化植物做好了准备。 (3)采用沾花法将实验室在前期构建好的ZmCBL6和ZmCBL8表达载体转化拟南芥,经筛选和分子检测获得转基因株系。 (4)通过对ZmCBL6和ZmCBL8转基因株系在不同非生物胁迫条件下进行抗逆性鉴定,证明两个基因主要在抵抗盐胁迫和水分胁迫中发挥功能,其中ZmCBL6的作用比ZmCBL8明显。


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