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四角蛤蜊CAT、GPX抗氧化酶基因的克隆

常悦  
【摘要】:贝类养殖是我国传统海水养殖业中的重要组成部分。贝类通常利用滩涂进行养殖,而滩涂是海洋环境中受人类活动影响最为严重的区域。我国滩涂面积广阔,随着滩涂生态与环境状况的恶化,以及病害的不断爆发,滩涂贝类的养殖面临重大的威胁。 贝类受到各种压力胁迫刺激时,往往导致机体活性氧自由基的产生。依靠活性氧分子极强的反应特性,实现对入侵病原的杀灭。但是这种机制不具特异性,因而也会破坏生物体自身的生物膜、蛋白分子及核酸等,诱导细胞凋亡,对机体造成严重的伤害。机体的抗氧化防御系统能够及时清除活性氧,维持机体内氧环境平衡,保护机体免受氧化损伤。其中,过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是抗氧化防御系统的关键酶类。 四角蛤蜊作为一种典型的埋栖型滩涂贝类,广泛分布在我国、韩国和日本沿海,是我国主要的经济贝类之一,也是开展滩涂增养殖的优质品种。其埋栖生活的特性,对沉积物污染有较好的指示作用。本研究采用同源克隆的方法,对四角蛤蜊过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)基因进行克隆,首次得到过氧化氢酶(CAT)基因cDNA片段,共780bp,编码211个氨基酸。具有在大多数物种中较为保守的CAT基因的特征性序列结构,查找到一个CAT基因催化活性位点Asn145,以及9个NADPH的结合位点。通过系统进化树的构建,表明四角蛤蜊CAT基因与硬壳蛤及文蛤的亲缘关系较近。


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