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沙柳NACs基因克隆、生物信息学分析及表达

于兴旺  
【摘要】:沙柳是我国西北地区防风治沙的主要树种之一,对维持沙地生态系统的稳定起重要作用,是城市建设和环境绿化工程中的重要元素。促进沙柳的分子定向育种,研究基因调控机制对于开发沙柳潜在价值有重要意义。本研究利用同源克隆技术从沙柳中克隆获得SpsNAC005、SpsNAC034、SpsNAC041、SpsNAC042基因,对其进行生物信息学分析,组织特异性表达及构建目标基因的超量表达载体。研究结果如下:①SpsNAC005基因的CDS序列长度为927bp,编码309个氨基酸,SpsNAC034基因的CDS序列长度为1797bp,编码599个氨基酸,SpsNAC041基因的CDS序列长度为885bp,编码295个氨基酸,SpsNAC042基因的CDS序列长度为900bp,编码300个氨基酸。四个基因均有NAC基因家族的典型结构域NAM,属NAC基因家族。②RT-qPCR结果表明,SpsNAC042在成熟的叶中表达量最高,在花中几乎不表达。③本研究获得SpsNAC005超表达转基因84K杨株系7个,SpsNAC005超表达转基因河北杨株系5个,SpsNAC034超表达转基因河北杨株系5个,SpsNAC041超表达转基因84K杨株系4个,SpsNAC041超表达转基因河北杨株系5个,SpsNAC042超表达转基因84K杨株系9个,SpsNAC042超表达转基因河北杨株系3个。本研究进一步丰富了 NAC基因家族的分子遗传学信息,为沙柳中NAC基因家族的功能研究奠定了基础,为沙柳育种工作提供了理论依据,为园林树木改良提供了方向。


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