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蒙古绵羊β-防御素sBD-1全长cDNA的扩增及组织表达

包图雅  
【摘要】:本文主要研究蒙古绵羊β-防御素-1(sBD-1)。从蒙古绵羊瘤胃黏膜上皮组织中提取总 RNA,采用 RT-PCR 技术扩增出 sBD-1 的 cDNA,将产物测序,得到该 cDNA包含由 192 个碱基组成的开放读码框(ORF),该 ORF 编码 64 个氨基酸残基的前原防御素,该前原防御素含有β-防御素的特征性结构即六个在特定位置上的保守半胱氨酸残基。我们采用 cDNA 末端快速扩增即 RACE 技术,主要包括锚式 PCR RACE 技术和反向嵌套 PCR RACE 技术分别扩增出蒙古绵羊 sBD-1 的 3ˊ末端和 5ˊ末端,经测序得到 sBD-1 的 cDNA 全长序列。 为了检测 sBD-1 mRNA 在蒙古绵羊体内的可能的表达器官,提取蒙古绵羊的整个消化道、生殖器官,心脏等器官内的总 RNA,通过 RT-PCR 检测 mRNA 的表达。结果显示:sBD-1 mRNA 在整个消化道(除直肠)、气管、脾脏、子宫等管状器官内的黏膜层内有表达,而在实质性器官如心脏、肝脏、肺脏、肾脏、淋巴结、膀胱、卵巢、输卵管中无 sBD-1 mRNA 表达。


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