收藏本站
收藏 | 论文排版

常用布鲁氏菌疫苗功能基因序列分析及AMOS检测方法研究

杨海荣  
【摘要】: 试验内容,AMOS-PCR是一种能够鉴别诊断布鲁氏菌病原的一种PCR方法,本试验中对其分型鉴定进行了研究。对我国常用疫苗S2、M5、S19、104M使用该方法,并做单一基因的AMOS-PCR来验证其在鉴别布鲁氏菌各种的特异性。 对国内常用的布鲁氏菌疫苗S2、M5的一些功能基因进行克隆测序,并与已发表序列进行比对分析,这些基因有保护性抗原基因Omp31、Omp25、Omp2b、p39、L7/L12以及毒力因子四型分泌系统中的关键位点virb8基因。 结果显示,(1)AMOS-PCR在鉴定布鲁氏菌病原上有着很好的效果,可区分布鲁氏菌各个种,四株布鲁氏菌S19,104M,M5,S2都得到了很好的鉴别诊断,同时单一基因的PCR也扩增出各自特异的条带,说明了这种方法在种间有着很好的特异性,无交叉反应。 (2)扩增出了5个保护性抗原基因。得到其核酸序列,其中L7/L12测得大小为375bp序列;p39测得1207bp的序列;Omp2b测得1089bp的序列;Omp31测得723bp的序列;Omp25测得642bp的序列。 序列分析表明,我国常用布鲁氏菌疫苗的这几种基因与国外菌株同源性极高。S2、M5与其他菌株相同基因有着很高的同源性,S2菌株5个基因与其他菌株的同源性在97.1%~100%;M5菌株5个基因与其他菌株的在95.1~100%。相比较而言布鲁氏菌Omp2b在这几株疫苗菌株中差异最显著。S2 Omp2b基因与其他菌株同源性为97.1~98%;M5 Omp2b基因与其他菌株的同源性为95%~97.1%。 (3)对S19、104M、S2、JYS2、M5、TKM5、及一株由免疫羊体分离的菌株命名为41#菌株共7株毒力基因Virb8进行测序。测得Virb8基因长720bp,序列分析结果表明,该基因同源性极高,达到99.7%~100%。说明这个基因高度保守。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 杨吉飞;关贵全;牛庆丽;刘志杰;李有全;刘军龙;马米玲;任巧云;刘爱红;罗建勋;殷宏;;莱姆病间接ELISA诊断方法的建立及应用[J];中国兽医科学;2011年07期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴斌;王玫;王长文;刘霞;;布鲁氏菌分子生物学快速检测技术的研究[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
2 曾政;于三科;王希良;;布鲁氏菌17.3kDa蛋白的表达及免疫效果研究(英文)[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
3 谷文喜;钟旗;吴冬玲;何倩倪;热合木江 达吾提;叶峰;吐尔洪;李金平;赵兵;;七株布鲁氏菌VirB8基因的克隆与序列分析[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
4 刘文娟;吴清民;林怀樱;任婕;刘文晓;杨羽;王晓夏;;羊布鲁氏菌转座子突变株文库构建及毒力基因的初步鉴定[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
5 潘文;李珊珊;赵明秋;琚春梅;陈金顶;;新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
6 潘文;李珊珊;赵明秋;琚春梅;陈金顶;;新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
7 潘文;李珊珊;赵明秋;琚春梅;陈金顶;;新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用[A];2010第二届中国食品安全高峰论坛论文集[C];2010年
8 丁家波;杨宏军;康孟佼;程君生;毛开荣;蒋玉文;;布鲁氏菌在豚鼠和奶牛体内诱导的抗体水平和变态反应强度相关性研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
9 邱昌庆;;OIE推荐的牛布鲁氏菌病诊断技术[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
10 赵茜;吴清民;任婕;牛建蕊;杨羽;刘文晓;王晓夏;刘文娟;;流产布鲁氏菌转座子突变株文库构建及毒力基因的初步鉴定[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙丽媛;吉林省布鲁氏菌流行株种属鉴定及其耐药分子机制的研究[D];吉林大学;2011年
2 张辉;羊种布鲁氏菌感染胚胎滋养层细胞的分子机制研究[D];石河子大学;2009年
3 陈燕芬;布鲁氏菌中国分离株遗传多态性研究[D];吉林大学;2012年
4 杨艳玲;羊布鲁氏菌蛋白质组学分析及免疫候选抗原的筛选与鉴定[D];吉林大学;2011年
5 刘文兴;布鲁氏菌标记疫苗(M5-90-26)的鉴别诊断及其bp26蛋白的免疫原性分析[D];南京农业大学;2011年
6 王玉飞;IV型分泌系统调控布鲁氏菌胞内生存的分子机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
7 赵忠鹏;布鲁氏菌毒力、免疫相关分子的筛选研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
8 乔凤;外膜蛋白Omp25在布鲁氏菌毒力及免疫保护中的作用研究[D];吉林大学;2009年
9 曲勍;QS系统VjbR在布鲁氏菌胞内生存中作用的研究[D];吉林大学;2009年
10 朱才众;布鲁氏菌噬菌体裂解酶基因表达、生物活性鉴定及裂菌动力学研究[D];第三军医大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨海荣;常用布鲁氏菌疫苗功能基因序列分析及AMOS检测方法研究[D];内蒙古农业大学;2007年
2 唐婕;布鲁氏菌膜蛋白组学研究及免疫蛋白的筛选鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
3 李勇;布鲁氏菌小鼠感染模型的建立及在疫苗保护性评价中的初步应用[D];吉林大学;2011年
4 张芳毓;布鲁氏菌毒力相关基因的筛选和鉴定[D];吉林农业大学;2011年
5 莫莎;家畜布鲁氏菌病流行病学调查及布鲁氏菌单核苷酸多态性分子分型研究[D];南京农业大学;2011年
6 杨毅;不同种型布鲁氏菌进化中基因获得与缺失研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
7 申峰勇;延边牛布鲁氏菌的分离及bp26基因的克隆和原核表达[D];延边大学;2012年
8 孙春辉;羊布鲁氏菌16M感染巨噬细胞膜蛋白质组学研究[D];吉林大学;2011年
9 高洪霞;不同血清学方法检测牛羊布鲁氏菌疫苗免疫抗体消长规律的比较研究[D];东北农业大学;2010年
10 童永亮;牛型布鲁氏菌苹果酸脱氢酶酶学性质及其免疫学特性研究[D];西南大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 刘冕;7月起城北居民可乘S2线上下班[N];北京日报;2011年
2 本报记者 袁志勇;别让动物把布鲁氏菌传给你[N];科技日报;2010年
3 晓艳;布鲁氏菌疫苗仅能对抗肝脾感染[N];医药经济报;2002年
4 本报记者 陈煜儒;北京S2号线属于国家铁路[N];法制日报;2009年
5 本报记者 刘冕;S2线降价俩月日均客流增7倍[N];北京日报;2011年
6 本报实习记者 朱怡兵;索尼S2平板震撼登场 智能终端进入双屏时代[N];通信信息报;2011年
7 记者 孟为 实习生 高玉;S2线7月起票价降至6元[N];北京日报;2011年
8 竹青;二次污染尚存何谈奶源卫生[N];中国食品质量报;2003年
9 中天联科总裁 CEO 孙凤文 博士;推动DVB——S2产业在中国发展[N];中国电子报;2010年
10 谭英;当心猫狗影响家人健康[N];医药养生保健报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978