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SARS冠状病毒木瓜样蛋白酶生物学功能研究

胡日查  
【摘要】: 本研究利用分子克隆技术构建严重急性呼吸系统综合症冠状病毒(SARS-CoV)木瓜样蛋白酶(PLpro)的截断体和其蛋白酶活性缺失突变体,研究PLpro去泛素化、去ISG化和去SUMO化的分子机制。实验结果表明,PLpro蛋白的三个蛋白酶活性位点C1651、H1812、D1826对其去泛素活性均有影响,但C1651起着主要作用,而H1812和D1826起到辅助作用;C1651和H1812对PLpro蛋白去ISG15活性是必需的,而D1826的突变对其去ISG15活性无影响;游离态PLpro无去SUMO化活性,而带有跨膜域(transmemberane domain, TM)的PLpro-TM则有一定程度的去SUMO化活性;截去PLpro蛋白N末端泛素样结构域(Ubl)后,对PLpro的去泛素和去ISG15活性均无影响;从PLpro-TM中截去NAB-G2M结构域的实验证明,TM的核周内质网膜定位功能是PLpro-TM发挥去SUMO作用的原因,NAB-G2M结构域并不参与其去SUMO反应。


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