收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

海藻酸钙/明胶微胶珠的制备及在神经干细胞培养中的应用

刘朋  
【摘要】:神经干细胞作为一种在临床治疗神经退行性疾病和神经损伤等疾病方面具有很有潜力的干细胞类型,目前存在着来源有限导致其数量不足以实现大规模应用的障碍。传统的体外扩增方法包括神经球悬浮培养和贴壁培养法,存在扩增速率不高,且不能很好模拟活体真实环境等缺陷而越来越显示出其局限性。 海藻酸钙微胶珠作为一种细胞固定化的载体和技术手段,具有价格低廉,操作简单、固定化条件温和,营养基质和代谢产物等物质扩散阻力小,生物相容性好等诸多优点。当前,海藻酸钙微胶珠技术在细胞的体外扩增和体内移植等领域已经得到普通重视和应用,但其作为细胞载体应用于神经干细胞包囊的相关研究还很少。 明胶是一种天然的高分子材料,其结构与机体细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)结构相似,具有良好的生物相容性,在生物医学领域有着广泛的应用。本研究使用海藻酸钠和明胶作为基质材料制备了海藻酸钙/明胶微胶珠,以期获得一种和当前的细胞载体相比更有利于细胞生长增殖的培养体系。 为了探讨这种复合材料微胶珠应用于神经干细胞体外培养和扩增的可行性,首先用自制的穿刺力测试仪研究了海藻酸钠,明胶和CaCl2浓度等不同制备条件对微胶珠耐穿刺强度的影响;并研究了微胶珠耐培养基的浸泡强度性能。为了检测此种微胶珠的渗透性能,以微胶珠为对象建立了扩散模型,研究了葡萄糖和BSA在微胶珠中的扩散情况,并模拟得到了葡萄糖在微胶珠中的扩散系数与海藻酸钠,明胶和CaCl2浓度的关系方程。通过综合分析强度和扩散性能等参数,得出静态培养最佳的制备参数为:海藻酸钠:1.5%;明胶:0.5%;CaCl2:4%。 其次,本研究采用优化后的制备参数对神经干细胞进行了包囊培养,并比较了包囊培养前后神经干细胞在形态和nestin表达情况。结果显示海藻酸钙/明胶微胶珠与神经干细胞有良好的生物相容性,包囊培养11d后收获的细胞nestin阳性,经血清处理后可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,表明仍保持神经干细胞特性。同时对比了不同包囊密度神经干细胞的增殖倍数,确定了最佳包囊密度约为1.5 x 105 cells.mL-1;此外,还系统检测了包囊培养神经干细胞的耗氧速率,葡萄糖消耗以及表面抗原的变化情况等参数,为微胶珠技术应用于神经干细胞的体外规模化动态培养探索了工艺参数并提供了理论依据。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 胡炜;熊冬梅;陈丹丹;白明坤;倪庆顺;邓小勇;;不同长度多壁碳纳米管的细胞毒性[J];上海大学学报(自然科学版);2010年06期
2 任俊莉,付丽红,邱化玉;明胶酰化氨基取代度影响因素的研究[J];皮革化工;2003年06期
3 ;明胶文摘[J];明胶科学与技术;2007年03期
4 殷海荣;林社宝;;羟基磷灰石明胶复合材料的研究进展[J];陶瓷;2009年04期
5 曾国爱;;热天生产高黏度明胶的方法[J];明胶科学与技术;2009年02期
6 缪进康;;明胶文摘[J];明胶科学与技术;2010年01期
7 崔福斋;任永娟;于晓龙;;中枢神经再生材料研究进展[J];中国材料进展;2010年12期
8 本刊编辑部;;中国轻工学会明胶协会成立[J];明胶科学与技术;1981年01期
9 孙良初;;明胶工厂的废水处理[J];明胶科学与技术;1985年01期
10 王庆岚;彭必先;;明胶卤化银乳剂制备的物理化学基础[J];明胶科学与技术;1985年02期
11 陈砥;;明胶的酯化及酞酰化[J];明胶科学与技术;1985年03期
12 王师俊;;硬胶囊生产[J];明胶科学与技术;1986年04期
13 ;江苏省南通县平潮明胶设备厂竭诚为我国三胶工业服务[J];明胶科学与技术;1988年04期
14 Michel De Clercq;徐文达;;IAG明胶中半光氨酸的测定[J];明胶科学与技术;1989年02期
15 李振华,唐晓松;明胶—戊二醛固定化双酶体系的研究[J];四川大学学报(自然科学版);1990年01期
16 傅宗强,董英;浓茶汁和明胶在槐花蜂蜜酒生产中的应用[J];酿酒科技;1991年02期
17 丁凤平;;明胶溶液粘度的pH效应[J];明胶科学与技术;1991年03期
18 唐汉玲;吴建华;;快速冻力测试试验[J];明胶科学与技术;1992年01期
19 王师俊;;划桨式浸洗机[J];明胶科学与技术;1992年03期
20 王敬忠,穆文杰;从中国明胶协会访美考察看中美明胶企业差距[J];影像技术;1997年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 姚立松;刘天庆;葛丹;崔占峰;马学虎;;海藻酸钙微胶珠培养神经干细胞[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
2 孙一睿;胡锦;王尔松;奚才华;姚海军;;单层黏附培养技术在哺乳动物神经干细胞体外稳定增殖和多向分化中的应用[A];中国医师协会神经外科医师分会第四届全国代表大会论文汇编[C];2009年
3 李力;万琪;刘永红;张巍;;小鼠神经干细胞培养及缺血神经元对其增殖、分化的影响[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
4 田东萍;苏敏;吴贤英;张舸;;硒、B-27在神经干细胞球存活与分化中的作用[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
5 杨华静;徐鹏;张苏明;;低浓度β-淀粉样蛋白对神经干细胞的作用机制研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
6 文玉军;王登科;孙征;刘海洋;张莲香;秦毅;;成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞的变化[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
7 张波;王任直;;脑梗死后神经干细胞原位增殖及其机理的实验研究[A];中国微循环学会第五届中国微循环学术大会论文摘要汇编[C];2004年
8 邢雪松;吕威力;;Wnt-1在大鼠脑缺血再灌注海马组织内源性神经干细胞早期增殖分化中的作用[A];创新沈阳文集(B)[C];2009年
9 朱慧;李晓红;戚菁;施维;吴信华;陆玉华;鞠少卿;刘炎;;Pax3负性调控神经干细胞分化过程中胶质纤维酸性蛋白的表达[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
10 李革飞;李剑平;;应用流式细胞术检测神经干细胞表面标志物-Nestin[A];中国输血协会第五届输血大会论文专集(摘要篇)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑敏;神经干细胞定向分化与移植治疗帕金森病的实验研究[D];重庆医科大学;2003年
2 卢洪流;成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究[D];第二军医大学;2001年
3 李巍;神经干细胞的分化调控及BDNF基因修饰后对大鼠脊髓损伤修复的研究[D];第三军医大学;2002年
4 张力;人胚神经干细胞及骨髓基质细胞移植治疗帕金森病恒河猴模型的实验研究[D];复旦大学;2003年
5 戴宜武;骨髓基质细胞定向分化为神经干细胞及自体移植治疗中脑损伤研究[D];第一军医大学;2002年
6 张所军;神经干细胞向胶质瘤干细胞迁移及对其生长特性的影响[D];华中科技大学;2011年
7 张在金;神经干细胞移植治疗大鼠脑创伤的实验研究[D];第二军医大学;2005年
8 尹丰;人视网膜色素上皮细胞治疗帕金森病的实验与临床研究[D];第二军医大学;2006年
9 谭太贵;多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤[D];天津医科大学;2006年
10 高国一;胎鼠脑神经干细胞鉴定纯化与生物学特性观察[D];第二军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘朋;海藻酸钙/明胶微胶珠的制备及在神经干细胞培养中的应用[D];大连理工大学;2011年
2 冯年花;人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的实验研究[D];南昌大学;2010年
3 宋精梅;比较新生大鼠脑部不同部位的神经干细胞被诱导分化为少突胶质细胞的差异[D];福建医科大学;2010年
4 李政;内皮祖细胞调控神经干细胞分化及其机制研究[D];第三军医大学;2010年
5 王念;绞股蓝皂苷对脊髓源神经干细胞体外培养的影响[D];陕西师范大学;2011年
6 郭兵;大鼠羊膜上皮细胞体外向类神经干细胞诱导分化及其移植后对视神经再生的作用[D];第二军医大学;2010年
7 吴珲;神经干细胞玻璃化冻存及其生物学特性的研究[D];大连理工大学;2011年
8 王培福;大鼠神经干细胞的培养和鉴定[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
9 刘孟宇;胶质瘤细胞条件培养基对神经干细胞迁移的影响[D];苏州大学;2010年
10 朱爱萍;重复经颅磁刺激对帕金森病模型小鼠体内神经干细胞增殖的影响[D];河北医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 孙国根;神经干细胞并非“全能制造者”[N];中国医药报;2009年
2 时仲省 高思敏;移植神经干细胞 瘫痪兔子可爬行[N];大众卫生报;2001年
3 王成应;能克隆的神经干细胞被分离[N];健康报;2004年
4 刘海英;脑癌源于脑下室区的神经干细胞[N];科技日报;2009年
5 孙国根 白毅;灵长类脑内神经干细胞被发现[N];中国医药报;2011年
6 北京康复中心神经外科 黄红云;神经干细胞之谜[N];健康报;2008年
7 刘霞;美将成人皮肤细胞变成神经干细胞[N];科技日报;2011年
8 沈丽 付钰;神奇的神经干细胞[N];科技日报;2002年
9 记者 吴苡婷;为脑损伤患者治疗打开希望之门[N];上海科技报;2009年
10 刘霞;美培育出能自我更新的神经干细胞[N];科技日报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978