收藏本站
收藏 | 论文排版

顺序注射微流控焦磷酸测序系统的改进及其应用

任倩倩  
【摘要】:DNA序列测定技术是现代生命科学研究的核心技术之一。与传统Sanger法相比,焦磷酸测序技术是一种实时的DNA测序技术,具有快速、高效、成本低的特点。现有的焦磷酸测序系统的发展主要有两种趋向:一种是针对大规模测序的高通量系统,另一种是针对床边检测的便携式的系统。本文在已有研究的基础上对基于磁珠微反应器的微流控焦磷酸测序系统进行了改进,并初步用于甲型流感病毒H1N1MP基因的分型和单核苷酸多态性检测。 首先利用导磁片诱导永磁铁加磁的方法将表面固载化学反应基团的磁珠固定在毛细管内形成流动微反应器,通过周期性改变毛细管与导磁片之间的距离的方法使磁珠在反应器中进行强制搅拌运动,使流动液固反应的效率得到有效改进。此流动微反应器的制作方法简单,不涉及任何微加工。通过改变磁场很容易进行磁珠的固定、搅拌及更换操作,微反应器可以实现重复利用,与顺序注射相结合成为通用性好的微流控流动分析平台。 其次,基于如上方法制作的流动微反应器,以注射泵为动力,微弱化学发光仪做为检测器,结合缝管阵列方法顺序引入试剂,建立了微型流动焦磷酸测序系统。通过向三酶系统的反应液中力加入apyrase(?)勺方法使背景信号大大降低。利用所建立的系统对反应条件进行了系统研究,成功测定了人工合成DNA单链的28个碱基序列,并用于甲型流感病毒H1N1MP基因的序列测定和SNP位点的检测,取得了与液相静态焦磷酸测序方法一致的结果。 此微流控焦磷酸测序系统搭建及控制方法简单、价格低廉、不需要微加工技术、易于实现自动化和便携化,特别是在克服传统焦磷酸测序方法的测序长度限制有很大潜力。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 占爱瑶;罗培高;;DNA测序技术概述[J];生物技术通讯;2011年04期
2 李晓晖;李鑫鑫;张维;燕永亮;陈明;陆伟;;宏转录组学在微生物生态学研究中的应用[J];中国农业科技导报;2011年04期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 何崇慧;陈晓旭;蒲巧生;;低成本紫色激光诱导荧光检测器的制作及其在微流控分析中的应用[A];中国光学学会2011年学术大会摘要集[C];2011年
2 方肇伦;;浅谈微流控分析系统应用中面临的机遇和挑战[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
3 刘华雷;王志亮;吕艳;黄伟坚;鄢明华;张维;李明义;王清华;李金明;郑东霞;赵云玲;孙承英;;应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(上册)[C];2009年
4 王春林;龚大江;张丽丽;臧留琴;李明;彭年才;张镇西;;焦磷酸核酸测序仪中微量加样系统的研制[A];中国生物医学工程进展——2007中国生物医学工程联合学术年会论文集(上册)[C];2007年
5 彭年才;张丽丽;王春林;李炜;苏明权;张镇西;;用于焦磷酸测序的不对称PCR制备单链DNA实验研究[A];中国生物医学工程进展——2007中国生物医学工程联合学术年会论文集(下册)[C];2007年
6 李咏梅;曾地刚;彭敏;马宁;陈晓汉;;用焦磷酸测序技术进行凡纳滨对虾CTSL基因的SNP分型检测[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
7 杜卫东;唐先发;汤华阳;许洪升;孙中武;郝加虎;陈刚;张学军;;TNFα rs1800629和LTA rs909253突变位点可能不是我国散发性帕金森病发生的易感因素[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
8 蔡增轩;陈恒武;陈彪;黄朝表;;高聚物芯片上的重力驱动微流动注射浸润膜萃取系统[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
9 何巧红;方群;方肇伦;;电驱动连续试样引入微流控芯片毛细管电泳分析系统[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
10 夏兴华;陈伟;王琛;李素娟;吴增强;;微纳流控分析系统用于蛋白质富集与酶反应动力学研究[A];中国化学会第27届学术年会第09分会场摘要集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 席永清;离心式微流控法快速分析环境污染物的研究[D];东华大学;2011年
2 古淑青;微流控液滴单细胞分析系统的研究[D];浙江大学;2011年
3 王芹;微流控芯片电泳在生物分子分析及荧光碳纳米颗粒表征中的应用[D];兰州大学;2012年
4 孙蒙;基于取样探针的微流控试样引入系统的研究[D];浙江大学;2009年
5 祝莹;基于微流控液滴系统的质谱和色谱分析方法的研究[D];浙江大学;2010年
6 潘建章;微型化吸收光度分析系统及其应用研究[D];浙江大学;2010年
7 曲平;分子印迹微流控手性分离研究[D];南京大学;2010年
8 吴婷;微分析系统在环境监测中的应用研究[D];华东师范大学;2010年
9 杜文斌;微流控高通量试样引入系统及其应用研究[D];浙江大学;2007年
10 王毅;带有化学或生物传感器的高聚物微流动注射安培检测芯片的研制及应用[D];浙江大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 任倩倩;顺序注射微流控焦磷酸测序系统的改进及其应用[D];东北大学;2010年
2 杨晓红;化学发光纸基微流控初步研究[D];陕西师范大学;2011年
3 唐帆;应用于环境检测的低成本微流控设备的构建[D];安徽理工大学;2012年
4 仵颖璠;微流控浓度梯度芯片的研制及其在药物诱导细胞凋亡中的应用[D];东北大学;2010年
5 杨芳;沙门菌条码基因研究及焦磷酸测序快速鉴定[D];河北师范大学;2011年
6 成双;微流控芯片电泳在食品分析中的应用研究[D];华东师范大学;2012年
7 陈学敏;基于气动混合的快速微流控DNA阵列杂交的研究[D];东北大学;2010年
8 刘吉晓;无阀微流控闭环调焦系统特性研究[D];哈尔滨工业大学;2010年
9 胡红美;微流控芯片电泳无泵负压进样装置研制和非水微流控芯片电泳—化学发光检测系统研究[D];浙江大学;2011年
10 毛静月;焦磷酸测序技术在高危型HPV分型中应用的研究[D];第二军医大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 范文;高新科学仪器将为人类造福[N];中国机电日报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978