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低温植酸酶产生菌的生物学特性研究

陈璨  
【摘要】:本论文的研究目的是为了得到高产低温植酸酶的菌株,并对其生物学特性(菌株分类鉴定、所产植酸酶的酶学性质、发酵产酶条件等)进行研究。 1.通过对实验室保藏的产低温植酸酶的菌株CZC0208的ITS(Internal transcriberspacer)rDNA的测序分析并建立系统发育树,初步鉴定CZC0208属于双足囊菌属(Dipodascus);由于其产酶能力下降,所以对其进行了紫外诱变育种,经多次实验,未得到产酶活力有明显提高的突变株。因此需进行产低温植酸酶的菌种的筛选工作。 2.经过对海水、海泥、土壤等样品的筛选,得到7株产低温植酸酶的菌株,经过酶活力测定,菌株CZC0806的酶活最高(分离自海水);由形态学及16s rDNA序列分析并构建系统发育树,初步鉴定菌株CZC0806为库特氏菌属(Kurthia);通过对其所产低温植酸酶的酶学性质进行的初步研究,可知该酶的最适温度为35℃,最适pH为5.5,金属离子对酶活的影响不明显;对菌株CZC0806的发酵产酶条件进行了优化研究,通过单因素及响应面设计分析实验,得到培养基最佳组成为:蔗糖3.38%、蛋白胨0.99%、NaCl0.82%、CaCl2·2H2O0.07%、MgSO4·7H2O0.03%、FeSO4·7H2O0.007%,又经过单因素及正交设计实验得到发酵条件为:发酵时间55h,温度20℃,初始pH7.0,接种量8%,振荡培养箱转速180r/min。在最佳发酵产酶条件下,菌株所产低温植酸酶酶活为114.51U/mL。


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