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羊肚菌多糖的提取及体外抗氧化活性的研究

黄玲玲  
【摘要】:多糖作为羊肚菌的主要活性有效成分,具有抗氧化、减缓衰老、增强免疫力等药用价值。本实验优化了羊肚菌多糖的醇提条件,对其体外清除自由基的抗氧化活性进行了探究,并在外源加入硒、锌微量元素的条件下,探究了硒、锌元素对羊肚菌多糖抗氧化活性的影响。本研究为羊肚菌多糖的开发应用提供了参考数据。(1)在单因素实验的基础上,运用响应面法(RSM)对羊肚菌多糖醇提时所需的pH值、乙醇添加比例、乙醇体积分数及醇提时间4个因素进行了优化。依据回归分析确定了理论的最优提取条件:pH 7.43,醇料比3.29:1,乙醇体积分数为85.12%,醇提时间23.54 h。在此条件下的多糖理论得率为724.386μg/m L,并对此优化条件进行了验证,结果表明,该模型具有可靠性和可行性,可用于对羊肚菌多糖的提取优化。(2)采用普鲁士蓝体系,Fenton体系和邻苯三酚自氧化的方法测定羊肚菌胞外多糖(EPS)、胞内多糖(IPS)的体外抗氧化活性,并同发酵液和菌丝浸提液相比较,结果显示:羊肚菌多糖对超氧阴离子自由基(O2-·)和羟基自由基(·OH)均具有清除能力,但远远低于同浓度发酵液和浸提液的清除能力;两种来源的多糖对O2-·清除能力的大小比较为EPSIPS;对·OH清除能力的大小比较为IPSEPS。(3)通过单因素实验选择硒、锌元素在羊肚菌发酵培养基中的适宜添加浓度,硒添加浓度为1.2 mmol/L,锌元素添加浓度为0.9 mmol/L。以VC作参照,测定羊肚菌多糖的抗氧化活性,研究结果表明:硒、锌微量元素的添加使羊肚菌多糖对O2-·的清除率提高了近50%,对·OH的清除率提高了近20%,当多糖浓度为3 mg/m L时,胞内硒多糖(IPS-Se)、胞内锌多糖(IPS-Zn)、普通胞内多糖(IPS)对O2-·的清除率分别为98.46%、96.7%、48.5%;对·OH的清除率分别为50.64%、40%、30.35%,但均低于相同浓度VC的清除率;比较IC50的大小判断抗氧化能力的强弱,结果表明:硒多糖的抗氧化性强于普通多糖,锌元素的添加使胞内多糖对O2-·的清除率增加了3倍。


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