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软枣猕猴桃多糖、黄酮的分离纯化及润肠通便活性研究

杨帆  
【摘要】:软枣猕猴桃是东北地区重要的野生水果,被冠以"世界珍果"之名。目前,全球慢病爆发,人们开始重视食疗保健,软枣猕猴桃作为第三代药食兼用保健品开发具有重要意义。本试验室前期研究表明,软枣猕猴桃多糖类物质可作用于脾脏,有降血糖作用,黄酮类物质可作用于肝脏,有保护肝脏的作用。基于慢病间的相通性及便秘的病机,本试验通过研究19种软枣猕猴桃的性状表现、次生物质含量、营养成分筛选出四个品系,并对这四个品系进行多糖、黄酮的提取及纯化,用提取物灌胃小鼠,探讨其对便秘小鼠的影响,以期为润肠通便类功能食品的开发提供理论依据。本试验主要研究结果如下:(1)分析19种软枣猕猴桃的次生物质含量,19个品系软枣猕猴桃均含有酚类、挥发油脂类,多糖及其苷、黄酮及其苷,不含萜类、鞣质及皂苷,其中1号、2号、4号、7号、8号、13号、19号品系含量均较高。通过分析营养物质含量得:19个品系的平均Vc含量为266.97 mg ·100g-1,平均还原糖含量为27.07%,平均可滴定酸含量为0.23%,平均可溶性固形物含量为19.58%,平均多糖含量为43.71%,平均黄酮含量为2.56%,其中2号、4号、7号、19号各物质含量均高于平均值,最后结合颜色、形状等性状表现分析,确定以上四个品系为后期试验用软枣猕猴桃,并重新编号为1号、2号、3号、4号。(2)采用热水提取法提取1号、2号、3号、4号品系多糖,得率分别为43.14%、45.01%、42.79%、58.02%。粗多糖经过DEAE-52纤维素层析柱法分离纯化后,1号多糖得到三个亚组分;AAP 2得到两个亚组分;AAP 3得到三个亚组分;AAP 4得到两个亚组分。各品系亚组分经紫外扫描图谱未见260 nm和280 nm蛋白及核酸,可见光部分也无色素,从SephadexG-100凝胶柱洗脱曲线可看出,各组分均只有一个主峰,说明以上各组分均为成分单一的多糖亚组分。通过红外光谱图分析可知,AAP1、AAP2、AAP 3、AAP 4均具有糖类特征的吸收峰,是由多种单糖通过α糖苷键及β糖苷键连接组成的杂多糖。(3)采用乙醇提取法提取1号、2号、3号、4号黄酮,提取率分别是2.79%、3.01%、3.27%、2.62%。通过电喷雾电离试验,初步确定AAF1中含有芦丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及大豆异黄酮苷五乙酸酯、金丝桃苷八乙酸酯;AAF2中含有芦丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及普罗西亚尼定八甲醚;AAF 3中含有芦丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及葛根黄酮六乙酸酯;AAF 4中含有芦丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及普罗西亚尼定八甲醚、八甲氧基黄酮。(4)小鼠灌胃试验显示,AAP各组较AAF各组、AAPF各组排便时间更快,品系间比较,AAP1AAP4AAP3AAP2;研究数据6小时排便粒数,AAPF各组比AAP组、AAF组6小时排便粒数更多,品系间比较,AAPF 4AAPF 3AAPF 2AAPF 1;粪便含水量比较,AAF各组较AAP各组、AAPF各组排便时间更快,品系间比较,AAF4AAF2AAF3AAF1;但粪便重量各组差异并不显著(p0.05),其中,AAP 4组效果最好,AAPF各组效果次之,AAF 1和AAF 3品系效果较好。


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