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虫生真菌蛹虫草交配型与亲和性研究

孙赫男  
【摘要】:通过对蛹虫草的菌株的菌丝生长及不同菌龄对生长的影响进行研究,结合线性回归与主成份分析数据分析方法得出,菌落中不同位置生长点的菌丝能够匀速且稳定生长,表明生长速率是验证菌丝体是否保持稳定的辐射状生长的主要因素,且菌龄对菌丝的生长没有影响。菌株在继代培养过程中,能够保持稳定生长状态。另外,对蛹虫草菌种进行保藏试验,结合摇培后菌悬菌丝体性状及孢子产生情况及人工诱导形成子实体等标准得出,蛹虫草菌种适宜以菌丝块的保藏形式,在4oC冷藏条件下保存,可添加少量蛋白胨作为保护剂,其保藏周期不低于12个月。本试验在检测部分保守序列基因的同时,对MAT1-1-2基因进行检测,从而发现交配型分为两大类,单交配型与复合交配型。并且存在MAT1-1-2基因缺失的情况。通过对分离自柞蚕蛹及人工培养基中的单子囊孢子菌株进行交配型检测,发现在单子囊孢子群体中,交配型分离比例接近1:1,并未发生偏离,在活体柞蚕及小麦培养基上所分离出的单子囊孢子群体的交配型分布具有一致性,且交配型MAT1-1发生频率略高于MAT1-2的发生频率。M110与M100的发生频率趋于一致。单交配型的单子囊孢子菌株群体的后代单分生孢子的交配型与其亲本交配型一致。另外,发现两种交配型的单子囊孢子菌株其后代单分生孢子的交配型均为MAT1-2。针对单交配型的三种类型菌株中,随机选取12个单子囊孢子菌株进行子实体产生试验,发现单个交配型菌株无法形成子实体,而当两个相反的交配型菌株混合培养,可诱导形成子实体。但交配型MAT1-1中出现MAT1-1-2基因缺失时,在同时具有交配型MAT1-2菌株培养条件下,仍无法形成子实体。对单子囊孢子菌株的对峙培养,观察菌落间交界处菌丝生长性状,对菌落交界处的菌丝融合情况进行显微观察发现,相同交配型菌株的亲和性优于不同交配型菌株间亲和性,相同交配型不亲和现象与MAT1-1-2基因有关。对检测到两种交配型的单子囊孢子菌株进行细胞核染色。发现,两种交配型基因的单子囊孢子菌株的后代单分生孢子中,部分细胞内同时存在两个细胞核,表明两个细胞核可能源于具有不同交配型的亲本。异核菌株可被诱导发育良好的子实体。因此,交配型MAT1-1与MAT1-2基因分布在同一细胞内的两个不同的核里,即单细胞中同时具有两种交配型的细胞核,并且可诱导形成子实体。当异核体菌株缺失MAT1-1-1基因时,影响子实体生长发育。


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