收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

影响食品安全的食源性致病菌快速检测技术与风险分析研究

邱驰  
【摘要】: 食品安全问题一直是各国政府和人民群众最为关心的问题,它关系到消费者的健康和生命。由病原细菌引起的食源性疾病是影响食品安全的最主要的因素之一。因此对食源性致病菌快速、准确的检测问题亟待解决。 本研究针对在食品微生物污染中比较常见的致病菌,开展了以分子免疫学、分子生物学为基础的检测技术改进与应用研究,采用胶体金免疫层析法,常规PCR法、实时荧光PCR法、高通量基因芯片法对食源性致病菌进行检测的系统研究,并把这些检测技术首次应用于进出境商品的鉴定检测,获得了成功。 首次系统地建立了国内外第一个食源性致病菌的检测技术体系,该体系的成功建立,极大的提高了进出境食品的检验效率,缩短了检验时限,对突破国外对我国设置的技术贸易壁垒起到了关键作用。 利用胶体金免疫层析技术,对金黄色葡萄球菌A、B型肠毒素,单增李氏菌溶血素O进行了快速检测的研究,开发了具有我国自主知识产权的葡萄球菌肠毒素和单增李斯特菌及李斯特菌溶血素胶体金检测试剂条,建立了一套方便现场使用并且容易操作的检测方法。该方法特异性强,不需任何附加设备,检测时间大为缩短,灵敏度高。为食源性致病菌的前期快速筛选做好了技术储备。 通过常规PCR技术对食品中常见的病原细菌进行了快速检测的试验结果表明,应用PCR方法可以很好的对食品中的食源性病原菌进行检测,仅用几个小时即可完成检验过程,大大的缩短了检测时间。对于缩短进出境货物通关时间具有十分重要的意义。 本研究采用实时荧光PCR技术,针对沙门氏菌等食品中常见的致病菌,通过检索文献,确定致病菌的靶基因序列,利用生物软件进行序列对比,截取最一致的序列进行引物探针设计,并筛选出适合实时荧光PCR检测的特异性探针,建立了沙门氏菌等11种食源性致病菌的实时荧光PCR技术,并研制出了适合于进出口检验检疫、疾病控制、临床诊断及产品质量检验使用的试剂盒。通过实时荧光PCR法检测食源性致病菌与国家标准、行业标准方法的比较,检出率完全相同,显示出该方法具有广泛而良好的适用性,对于11种食源性致病菌的检测限度可以达到84 cfu/mL-7000 cfu/mL之间完全满足检验检疫业务的需要。并且首次在DNA模板的制作过程中做出了平板菌落煮沸法的尝试,节省了试验步骤,取得了较好试验效果。 在基因芯片高通量检测食源性致病菌的研究中,优化出反应体系的9条探针及引物位点,并使多重PCR能够做到多重引物的同时扩增,克服了多重PCR反应条件优化过程中各引物之间的相互干扰,以及引物、探针荧光标记产物的长度和结构之间等存在的相互干扰等技术难点,确定了55℃为最适合杂交温度以及最佳杂交液配置方案,从而建立了基于多重PCR技术的高通量检测食源性致病菌的基因芯片检测技术。 对丹东口岸入境的十种冷冻水产品引起李斯特菌病、四种冷冻水产品引起沙门菌病和六种冷冻水产品引起副溶血性弧菌胃肠炎疾病的风险进行评估。建立了定量食源性致病菌危险性评估模型,结果表明:单次消费经丹东口岸进口的冷冻章鱼、海螺、青柳蛤肉、香螺、江瑶贝、蟹子、河虾、河螺肉、紫石房蛤和其它贝类,引起李斯特菌病的概率几乎为零,不具有危险性。单次消费经丹东口岸进口的冷冻海螺、河螺肉、香螺和其它贝类,引起沙门菌病的概率,对于正常人群分别为1.57×10~(-2)、7.62×10~(-3)、2.19×10~(-2)和1.62×10~(-2);对于易感人群分别为0.12、6.61×10~(-2)、0.15和0.12。单次消费经丹东口岸进口的冷冻海螺、章鱼、河螺肉、紫石房蛤、江瑶贝和蟹子,引起副溶血性弧菌胃肠炎的概率,分别为6.21×10~(-6)、6.65×10~(-7)、3.85×10~(-7)、1.26×10~(-8)、1.28×10~(-6)和9.18×10~(-7)。 本研究首次建立了食源性致病菌分子免疫学、常规PCR、实时荧光PCR和基因芯片检测以及同国家标准比对的技术体系,这也是国际上首次研究建立的的食源性致病菌的检测技术体系。本研究还在国际上首次对朝鲜进境的冷冻水产品进行了风险评估。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 林昇清,吴晶文;目前食品污染问题与防制探讨[J];海峡预防医学杂志;2004年05期
2 骆海朋;陈倩;;应用PCR方法对生鸡肉中分离到的空肠弯曲菌进行鉴定[J];中国卫生检验杂志;2008年02期
3 周建平;;襄樊市肉食品大肠杆菌污染状况的检测[J];安徽农学通报;2008年13期
4 余红;封会茹;赵伟;董晓根;;北京市丰台区公共餐饮业直接入口食品食源性致病菌污染状况调查[J];现代预防医学;2009年21期
5 杨瑞军;金莞尔;张建民;于丽莉;叶承华;吕磊;陈旭富;;2005-2007年衢州市食品中食源性致病菌监测[J];中国预防医学杂志;2010年06期
6 封会茹;董晓根;余红;赵伟;;北京市丰台区直接入口食品中食源性致病菌的污染状况[J];职业与健康;2011年11期
7 林升清,马群飞,陈伟伟,杨毓环;福建省2000-2001年度食源性致病菌监测分析[J];海峡预防医学杂志;2002年06期
8 吴蜀豫 ,冉陆;WHO食源性疾病与食源性致病菌耐药性监测培训班纪要[J];中国食品卫生杂志;2003年02期
9 唐振柱;李秀桂;黄林;蒋震羚;吕素玲;黄兆勇;方志峰;杨娟;王红;车光;;2002~2004年广西食源性致病菌监测研究[J];实用预防医学;2005年06期
10 沈月华;吴晓芳;程平庆;;湖州市食品中食源性致病菌污染状况调查分析[J];实用预防医学;2006年01期
11 杨浩民;王旭;刘卫东;胡风庆;;致病菌PCR快速鉴定研究进展[J];中国公共卫生;2007年09期
12 邵玉兰;何德辉;杨素君;麦婉湘;;2006年贵港市食源性致病菌监测结果分析[J];应用预防医学;2008年01期
13 张鸿斌;左翠瑛;;湖北省黄石市6类食品食源性致病菌检测[J];中国卫生监督杂志;2009年04期
14 曹鹏远;;长春市餐饮业直接入口食品中食源性致病菌污染状况调查[J];中国实用医药;2009年34期
15 刘国蓉;孙伟;金文军;芦丹;张海玲;;北京市昌平区餐饮业直接入口食品中食源性致病菌污染状况调查[J];职业与健康;2010年02期
16 葛明;江晓;包亚慧;;速冻米面制品中食源性致病菌污染调查[J];江苏卫生保健;2010年01期
17 王笑笑;高腾云;;影响牛肉质量安全的主要食源性致病菌危害性分析[J];中国农学通报;2010年17期
18 章红顺;;2008-2010年溧水县市售食品食源性致病菌监测结果分析[J];河南预防医学杂志;2011年05期
19 戴建华,袁宝君,陈太基,乔昕;江苏地区食源性致病菌监测及其耐药性试验结果分析[J];中国卫生检验杂志;2003年03期
20 赵江义;;鄂州市食源性致病菌污染状况监测分析[J];中国卫生检验杂志;2006年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李慧艳;陈倩;张正;;北京2008年奥运会相关餐饮业食源性致病菌监测分析[A];北京市营养学会第四届会员代表大会暨膳食与健康研讨会论文集[C];2010年
2 李志勇;高东微;易敏英;王志强;凌莉;;我国华南地区常见食源性致病菌分布规律研究[A];2010第二届中国食品安全高峰论坛论文集[C];2010年
3 李小春;陈慧燕;章乐怡;李毅;王良怀;洪程基;吴跃进;;温州地区食源性致病菌污染调查[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
4 王素英;申江;;微生物污染及食源性致病菌的快速检测技术[A];第3届中国食品冷藏链新设备、新技术论坛论文集[C];2007年
5 翁思聪;朱军莉;励建荣;;水产品中四种致病菌多重PCR检测方法的建立及评价[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年
6 孙力军;王雅玲;陈宏;;芽孢杆菌抗菌肽应用于海产品安全控制面临的关键科学问题及研究策略[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
7 翁思聪;朱军莉;励建荣;;水产品中四种致病菌多重PCR检测方法的建立及评价[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
8 陈卫国;汪垂章;张建民;金莞尔;王文英;于丽莉;杨瑞军;叶承华;;2002-2004年衢州市食源性致病菌监测[A];第三届浙江中西部科技论坛论文集(第九卷 预防分卷)[C];2006年
9 陈珊珊;程书梅;齐哲;李英军;亢春雨;樊喜福;苏旭东;张伟;;PCR检测乳及乳品中常见食源性致病菌的研究[A];2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C];2007年
10 宫彬彬;于师宇;孟宪梅;卢士英;任洪林;柳增善;王克坚;;食源性致病菌六联融合毒素的构建及免疫学特性研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 余水静;食源性致病菌特异性靶点发掘系统及数据库的构建[D];上海交通大学;2012年
2 孙智勇;食源性致病菌高通量悬浮芯片检测技术研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
3 邱驰;影响食品安全的食源性致病菌快速检测技术与风险分析研究[D];沈阳农业大学;2008年
4 郭丹;两种重要食源性致病菌O血清型分子分型系统的建立、两株不同宿主来源的大肠杆菌比较基因组学和转录组学研究[D];南开大学;2013年
5 卢行安;宫颈癌患者核糖核酸酶抑制因子基因突变分析和常见食源性致病菌快速检测技术体系的建立[D];大连医科大学;2007年
6 王耀;肉制品和乳制品中致病菌检测技术体系建立及李氏菌分型鉴定与溯源研究[D];沈阳农业大学;2011年
7 段诺;食源性致病菌适配体的筛选及分析应用研究[D];江南大学;2013年
8 叶若松;ε-聚赖氨酸抑制致病菌分子机理及对肠道菌群多样性影响的研究[D];南昌大学;2013年
9 鲁曦;低剂量抗生素刺激条件下耐药基因水平传播的机制研究[D];华南理工大学;2012年
10 孟赫诚;广州市熟肉制品微生物污染状况及其耐药性传播研究[D];华南理工大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张雅琪;基于傅里叶变换近红外光谱法的食源性致病菌的鉴别研究[D];河南科技大学;2011年
2 路春霞;应用红外光谱法区分常见食源性致病菌的研究[D];上海海洋大学;2011年
3 陈艳;纳米材料在食源性致病菌检测和生物成像中的应用研究[D];上海师范大学;2012年
4 程晓艳;几种食源性致病菌快速检测技术的建立[D];中国海洋大学;2012年
5 周明东;食源性致病菌快速检测方法的建立及其试剂盒的研制与应用[D];山东农业大学;2012年
6 王静;基于傅立叶变换红外光谱和化学计量技术的致病微生物鉴别系统研究[D];山东大学;2012年
7 李毅;温州地区食品中五种主要致病菌的调查分析[D];浙江大学;2010年
8 王文娟;食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用[D];山东农业大学;2011年
9 张旭明;生物条形码信号放大技术检测食源性致病菌DNA的研究[D];宁夏大学;2013年
10 王如景;三种食源性致病菌多重PCR快速检测方法的研究[D];河北农业大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 实习生 李玉洁;我市完成上半年食源性致病菌监测[N];张掖日报;2011年
2 记者 梁晓 通讯员 高世博 卢祎舟;我市完成食源性致病菌监测检验[N];郑州日报;2011年
3 魏小刚;我国食源性致病菌检测技术取得新突破[N];中国医药报;2005年
4 张若凡;广西7部门联手监测12类食品中污染物和有害因素[N];中国食品报;2011年
5 记者 张淑会 实习生 马虹;农田到餐桌将实施全程监测[N];河北日报;2010年
6 本报记者 胡应翔;贯彻新法 严格把关[N];中国食品报;2011年
7 ;食品测试技术有新突破[N];中华工商时报;2005年
8 记者 胡晓云;食品中57种化学物质受到监测[N];健康报;2009年
9 本报记者 郑俊彦;购买食品切勿“以貌取人”[N];东莞日报;2008年
10 王轲真;健康元食品检测技术获重大突破[N];深圳特区报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978