收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

CXCL9在子痫前期滋养细胞中低表达及可能对其增殖、迁移、侵袭及Akt信号通路作用的影响

赵鸽  
【摘要】:前言子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有疾病,是引起孕产妇和胎儿发病和死亡的主要原因之一,其主要临床表现为妊娠20周后出现以高血压和蛋白尿为特征的全身多系统综合征,发病率占孕妇的5%-8%。已有大量的假说和理论阐述子痫前期的病因学,如异常的免疫反应、氧化应激、异常的胎盘植入、胎盘功能以及遗传因素等。国外学者提出了子痫前期发病机制的“两阶段学说”。其中核心内容包括:第一阶段,在孕早期,由于免疫、遗传、内皮细胞紊乱等因素可造成子宫螺旋小动脉生理性“血管重铸”障碍,滋养细胞因缺血导致侵袭力减弱,造成“胎盘浅着床”,子宫动脉血流阻力增加,致使胎盘功能下降;第二阶段,孕中晚期,由于缺血缺氧的胎盘局部氧化应激反应,诱发内皮细胞损伤,从而释放大量炎症因子,形成炎症级联效应和过度炎症的发生,而导致子痫前期及子痫的各种临床症状。尽管国内外学者对其病因及发病机制进行了大量研究,但目前尚无确切的理论学说能满意并全面的解释。因此,对子痫前期发病机制的研究仍是产科医生的一大挑战。趋化因子是一类包含4个保守半胱氨酸残基,具有化学趋化功能的多肽。根据其第1、第2个半胱氨酸之间所含其他氨基酸的个数,可分为CXC、CC、C及C3XC四个家族。趋化因子通过与不同细胞类型的受体结合而发挥不同的功能,在n端区(CXC、CC、CX3C和C)中,趋化因子的作用可分为4个主要基团。趋化因子的主要作用是吸引免疫细胞到免疫应答局部,参与免疫调节和病理反应。趋化因子在机体中发挥重要的生理和病理效应,炎症、肿瘤、自身免疫病等疾病的发生发展均具有趋化因子或其受体的表达异常。已有报道子痫前期孕妇与子代高血压、糖尿病及先天性心脏疾病的发生密切相关,采用超声多普勒测量心脏轴的异常对筛查胎儿心脏具有灵敏度高和特异性强的特点。然而,子痫前期胎儿心脏的异常是否有某些趋化因子表达异常存在相关性目前并不清楚。趋化因子CXCL9又称MIG,人CXCL9基因位于染色体4q21上,属于干扰素γ诱导的CXC家族趋化因子,主要分布在Th1、B细胞和NK细胞等,有介导和调节免疫及炎性反应的作用。正常生理状况下CXCL9在多数非淋巴组织中检测不到,但在发生感染、损伤或免疫炎性反应时可由干扰素γ等诱导而产生。CXCL9的受体是CXC亚族的CXCR3,而CXCR3同时也是趋化因子CXCL10和CXCL11的受体。CXCL9的趋化作用主要通过CXCR3的介导作用完成。我们前期研究,应用DNA微阵列技术检测了正常妊娠孕妇胎盘和子痫前期患者胎盘组织中的基因表达差异,结果显示CXCL9 mRNA在子痫前期患者胎盘滋养细胞中低表达,然而CXCL9在子痫前期患者胎盘滋养细胞中蛋白的定位表达和定量表达是否也存在差异,目前尚不清楚。本研究目的是在前期研究的基础上,探讨CXCL9蛋白在正常妊娠和子痫前期胎盘滋养细胞中定位及定量表达是否存在着差异,并对正常妊娠胎盘滋养细胞增殖、迁移、侵袭及Akt信号通路作用的影响,从而进一步探讨CXCL9在子痫前期发生发展中可能的作用机制。方法第一部分:病例筛选和CXCL9蛋白在子痫前期胎盘滋养细胞中的定位表达差异收集2015年9月-2016年8月在中国医科大学附属第一医院产科分娩的子痫前期患者胎盘30例,同期妊娠健康孕妇患者30例为正常对照组。本研究经中国医科大学附属第一医院伦理委员会批准,所有研究对象均签署知情同意书,孕妇在孕周、年龄、身高、体重等一般条件匹配,月经规则,本次妊娠经过正常,无任何合并症和并发症(子痫前期除外),既往无不良妊娠史,无原发性高血压、糖尿病、肾病、癌症等病史,无嗜烟、嗜酒等不良生活习惯;入组孕妇均为第一次妊娠,单胎,根据末次月经及孕早期超声认真仔细核对孕周。应用免疫组织化学法,检测CXCL9蛋白在子痫前期胎盘中的定位表达;应用Western blot及Real-time PCR法,检测CXCL9在子痫前期胎盘中蛋白和mRNA的定量表达。第二部分:CXCL9对滋养细胞HTR-8/SVneo增殖、迁移及侵袭的影响体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,通过shRNA慢病毒感染敲除CXCL9基因后,应用CCK-8法检测不同干预条件下滋养细胞HTR-8/SVneo的增殖情况;应用transwell法检测敲除CXCL9基因前后滋养细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭能力的改变。第三部分:CXCL9影响滋养细胞HTR-8/SVneo侵袭机制的研究体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,通过shRNA慢病毒感染敲除CXCL9基因后,应用Western blot法,检测敲除CXCL9基因前后滋养细胞中MMP-2及MMP-9蛋白的表达变化;应用特异性Akt抑制剂,检测CXCL9对下游Akt信号通路的作用影响。结果第一部分:我们利用免疫组织化学、Western blot及Real-time PCR方法检测CXCL9在子痫前期胎盘滋养细胞及正常妊娠胎盘滋养细胞中的定位表达变化。结果显示CXCL9在正常妊娠胎盘滋养细胞胞核和胞浆中均呈阳性表达;而在子痫前期患者胎盘滋养细胞胞核和胞浆中的表达减弱及部分滋养细胞表达缺失,两者表达存在着统计学差异,子痫前期胎盘滋养细胞中平均密度明显降低。应用Western Blot和Real-time PCR检测发现CXCL9在子痫前期胎盘组织中的蛋白和mRNA表达水平明显低于正常胎盘组织,其差异具有统计学意义。提示CXCL9蛋白的定位、定量及mRNA的表达可能与胎盘滋养细胞的功能密切相关。第二部分:应用CCK-8细胞增殖检测法,检测CXCL9对滋养细胞HTR-8/SVneo增殖能力的影响,发现被shRNA慢病毒感染后的滋养细胞HTR-8/SVneo的增殖能力明显降低。应用transwell法,检测细胞迁移和侵袭的能力,同时发现被shRNA慢病毒感染后的滋养细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭的能力也明显减弱。第三部分:与阴性对照组比较,CXCL9基因被敲除后的滋养细胞中MMP-2及MMP-9的蛋白表达明显下降,磷酸化Akt(p-Akt)明显下调,而磷酸化ERK(p-ERK)水平没有变化。在未敲除CXCL9基因的滋养细胞中,应用Akt抑制剂MK-2206处理细胞后,MMP-2和MMP-9蛋白水平显著下调。结论1.CXCL9在子痫前期胎盘中蛋白的表达明显低于正常妊娠胎盘中蛋白的表达,说明CXCL9的低表达可能是子痫前期胎盘滋养细胞病变的主要因素。2.CXCL9对滋养细胞HTR-8/SVneo的增殖、迁移和侵袭能力可能具有重要的促进作用。3.CXCL9促进MMP-2和MMP-9的表达上调可能是通过调控Akt通路实现的,而与ERK信号通路可能没有直接关系。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 魏风云;王悦华;魏晨;郭红宇;;子痫前期病因学研究进展[J];中国医学创新;2018年22期
2 张坚贞;贺晶;;再发子痫前期相关因素及母子转归的单中心临床研究[J];浙江大学学报(医学版);2015年03期
3 王莉;丁依玲;;尿免疫球蛋白80在子痫前期诊断及临床预后中的价值[J];中国妇幼保健;2018年15期
4 徐秋莲;全莉梅;章根琴;吴淋淋;黄续炜;李池慧;;血浆标志物与孕产妇子痫前期临床发病的相关分析[J];中华危重症医学杂志(电子版);2017年06期
5 周婧雅;张萌;李舒;王怡;;子痫前期国际疾病分类规则的修订进展研究[J];中国病案;2018年03期
6 伍绍文;赵友萍;;染色体微阵列技术在检测子痫前期发病机制中遗传变异的应用进展[J];中国优生与遗传杂志;2018年03期
7 李杰锋;蒋龙元;;子痫前期凝血功能异常及抗凝药在子痫前期中的应用[J];岭南急诊医学杂志;2018年01期
8 杨孜;;防范子痫前期综合征需多元化和有选择性[J];中国实用妇科与产科杂志;2018年05期
9 蔡雁;王晓莹;;如何监测、预防子痫前期走向重度[J];中国实用妇科与产科杂志;2018年05期
10 曹丽;李红梅;;中性粒细胞与淋巴细胞比值与子痫前期的相关性研究[J];中国妇幼保健;2018年10期
11 杨蕊;王永红;;MAPK信号传导通路与子痫前期关系研究进展[J];世界最新医学信息文摘;2018年34期
12 白爱峰;;妊娠子痫前期的护理体会[J];延安大学学报(医学科学版);2016年04期
13 乌日娜;;应用低剂量阿司匹林可改善子痫前期高危患者妊娠结局[J];中国医药指南;2016年34期
14 单虹;;血清β_2-微球蛋白对子痫前期的诊断价值[J];现代医药卫生;2016年24期
15 杨孜;;多因素、多通路、多机制致病解子痫前期综合征制胜真实世界临床实践[J];中国实用妇科与产科杂志;2017年01期
16 王彤洁;;血管内皮生长因子及其受体在子痫前期早期诊断中的价值[J];山西医药杂志;2016年24期
17 董伟妍;张继东;万佳义;刘伟;;高龄并发重度子痫前期对妊娠结局影响的临床分析[J];基层医学论坛;2017年05期
18 陈洪琴;周容;;高龄妇女孕期子痫前期的防治[J];实用妇产科杂志;2017年01期
19 何玉娥;;早发型重度子痫前期发病机制的研究进展[J];中国当代医药;2017年04期
20 付亮;;重度子痫前期并发胎盘早剥患者的临床特征及母婴预后[J];世界最新医学信息文摘;2017年16期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周智平;;重度子痫前期孕妇血镉及胎盘11β-羟基类固醇脱氢酶2的表达及意义[A];2015年泛长三角围产医学学术年会暨浙江省围产医学学术年会论文汇编[C];2015年
2 刘小刚;;子痫前期及严重并发症的诊治[A];玉溪市医学会妇产专业委员会第六届一次学术年会材料汇编[C];2014年
3 孙丽洲;;子痫前期的麻醉及液体管理[A];中华医学会第三次全国妊娠期高血压疾病学术研讨会论文汇编[C];2011年
4 沈洁;杨孜;王伽略;;临床风险因素对子痫前期发病影响探讨[A];中华医学会第三次全国妊娠期高血压疾病学术研讨会论文汇编[C];2011年
5 牛建民;;问题与挑战:子痫前期再评价[A];中华医学会第三次全国妊娠期高血压疾病学术研讨会论文汇编[C];2011年
6 卢洁;;重度子痫前期病史妇女随访性研究[A];全国妇产科新技术、新理论进展研讨会、全国助产专业护士培训班论文汇编[C];2011年
7 翟宏;许建成;续薇;;重度子痫前期实验室指标检测结果分析及意义[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年
8 苟文丽;;重度子痫前期的管理与转运[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议产科会场(产科学组、妊高症学组)论文汇编[C];2012年
9 蒋萌;林建华;;子痫前期的高危因素分析和风险预测[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议产科会场(产科学组、妊高症学组)论文汇编[C];2012年
10 孙睿;牛建民;侯明敏;温济英;林小红;段冬梅;;子痫前期产后心血管代谢风险及相关因素研究[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议产科会场(产科学组、妊高症学组)论文汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张萍;性激素代谢及血管生成通路相关基因多态性与子痫前期发病关系研究[D];山西医科大学;2018年
2 赵鸽;CXCL9在子痫前期滋养细胞中低表达及可能对其增殖、迁移、侵袭及Akt信号通路作用的影响[D];中国医科大学;2018年
3 赖华;子痫前期合并胎儿生长受限患者胎盘组织HSP70高表达通过NO系统影响胎儿宫内发育的机制探讨[D];南昌大学;2018年
4 宋立猛;IL-10基因多态性与早发和晚发型子痫前期的相关性研究[D];南方医科大学;2017年
5 孙颖;胎盘FGF13表达与子痫前期相关性的初步探索及子痫前期早期预测模型的建立[D];南方医科大学;2017年
6 付玉芬;NDRG1通过抑制滋养细胞侵袭参与子痫前期发病机制的探讨[D];青岛大学;2017年
7 张妍;自噬对氧化低密度脂蛋白诱导滋养细胞炎性反应的保护作用及其与子痫前期发病的关系[D];青岛大学;2017年
8 魏军;NK细胞在子痫前期血管内皮细胞损伤中作用[D];中国医科大学;2006年
9 孙波;基因芯片技术在子痫前期外周血白细胞差异表达基因研究中的初步应用[D];吉林大学;2006年
10 孙曙光;缺氧诱导因子1α对血管内皮细胞生长因子及其受体表达的调节及在子痫前期发病机制中的作用[D];中国医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭玲玲;孕前或孕早期叶酸摄入与子痫前期的相关性研究[D];山西医科大学;2018年
2 刘君;组织多普勒对高原地区正常胎儿和子痫前期胎儿心脏功能的定量评估[D];青海大学;2018年
3 谢解;子痫前期外周血及胎盘miRNA差异表达谱与生物信息分析[D];电子科技大学;2018年
4 张晓雯;低剂量阿司匹林对子痫前期高危孕妇妊娠结局影响的Meta分析[D];郑州大学;2018年
5 刘梦园;早发型重度子痫前期合并胎儿生长受限凝血指标及母婴结局分析[D];郑州大学;2018年
6 师凤娟;重度子痫前期胎盘组织lncRNA MVIH和AP-1与胎盘螺旋动脉重铸的关系[D];郑州大学;2018年
7 赵志英;孕妇血清维生素A、E水平与子痫前期的相关性研究[D];郑州大学;2018年
8 余洁;长链非编码RNA-LOC391533参与重度子痫前期螺旋动脉重铸不足的研究[D];郑州大学;2018年
9 邢文莹;小剂量阿司匹林对高危孕妇子痫前期的预防作用研究[D];郑州大学;2018年
10 王蕊;miR-181a-5p在胎盘滋养层细胞侵润和迁移中的作用机制研究[D];郑州大学;2018年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李正;抓住子痫前期诊断的“黄金线索”[N];健康报;2018年
2 闻唱;天冷妊高征偷袭准妈妈 高龄怀孕与肥胖是祸首[N];中国妇女报;2016年
3 健康时报记者 寇晓雯;罗氏诊断:18分钟识别子痫前期[N];健康时报;2016年
4 编译 王炜;孕妇出现子痫前期可增加心脏病风险[N];医药经济报;2009年
5 北京天坛医院妇产科 杨保军 陶金双;子痫前期:高龄孕妇多见[N];健康报;2016年
6 李正;革新检测技术为母婴安全护航[N];健康报;2016年
7 章关春孙美燕;妊高征母婴预后可以改善[N];健康报;2007年
8 北京大学附属第一医院妇产科教授 杨慧霞 陆铁琳;围产医学的四个研究热点[N];健康报;2007年
9 欧阳吁;妊娠期高血压怎么办[N];家庭医生报;2006年
10 本报记者 马艳红;科学合理应用女性健康检测 助力实现优生优育[N];中国医药报;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978