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先天性马蹄内翻足的病因及病理演变规律研究

杜世新  
【摘要】: 目的 先天性马蹄内翻足(congenital clubfoot,CCF)畸形包括前足内收,跟骨内翻和踝关节马蹄。病因多集中在遗传、神经等。在多数研究中,对其病理演变过程仍不详尽,故有必要对畸形何时发生、其病理演变过程如何,影响畸形严重程度的因素做深入研究。应用建立实验动物模型和体感觉诱发电位(somatosensory evoked potentials,SSEPs)等方法检测马蹄内翻足的中枢及外周神经功能情况,旨在进一步明确马蹄内翻足的病因及确定神经病变位点。 方法 一、模型建立及分组 83只雌性Wistar大白鼠随机分为对照组(15只)和实验组(68只),体重(230±11g)。实验组:从怀孕第十天起,将120mg/kg维甲酸(retinoic acid,RA)与石蜡油混悬液(40mg/ml)经胃管一次注入。其中第19天实验组各以120mg/kg、130mg/kg、140mg/kg的RA石蜡油混悬液经胃管一次注入。对照组:仅将不含RA的石蜡油同量同前注入。分别在大鼠孕期第17d(对照组4只、实验组16只)、第19d(对照组5只,实验组计36只:其中120mg/kg组16只、130mg/kg9只、140mg/kg11只)、第21d(对照组6只、实验组16只)剖宫取出胎鼠。对照组186只胎鼠中97足和实验组592只胎鼠中91只畸形足,行下肢和足相交的踝角测量(踝角系小腿和足纵轴所形成的角度,包括马蹄内翻)并将对照、实验组胎鼠后肢切取及胸腰段脊髓取材,Formalin液固定、石蜡包埋。胎鼠后肢分别在矢状、冠状及水平面连续切片,HE染色,脊髓尼氏染色(亚甲蓝法),光镜下观察;另分别切取后肢、胸腰段脊髓后戊二醛固定、包埋、切片定位脊髓前角,经醋酸铀-柠檬酸铅 双重染色,在透射电镜下观察。 二、临床资料 自221 年2月-2002年12 月,共检测4例正常儿童和CCF患儿48 例,男32例,女历例;双侧发病15例,单侧33例,共计63足。年龄3个月 -13岁,平均2.7岁;3个月-二周岁17例,男8例,女9例,平均7.7个月; 列周岁3二例,男凹例,女7例,平均5.9年。患儿均未经手术治疗。依据 Pavlocic和Simons评估方法分为:轻度15足O 例,其中双侧2例,单侧11 例h中度31足*3例,其中双侧8例,单侧15例八重度17足O 例,其中 双侧 5例,单侧 7例人应用 Nicolet公司 Viking IV肌电诱发电位仪,分别测 定双腔神经SSEP、双下肢神经传导速度(ne。e conduction velocity,NCV)、双 胶神经H反射(H-reflex人 (一)SSEP检测 鞍状刺激电极置于踝部腥神经所在处,以方波 2.7 HZ进行刺激,强度 <smA、以产生路短展肌轻度收缩为标准。记录电极分别于胭窝、腰四、颈 七及头部左右中央(国际脑电图电极安放10/20系统Cz旁开Zcm)记录诱 发电位信号。 (二)NCV检测 腥神、传导检测:常规法放置电极,刺激位点分别为内踝及胭窝胚神经 走行处,频率为1.OHZ。记录电极置于路短展肌,记录复合肌肉动作电位 (compotmd motor achon potentids,CMAPs),计算传导速度。 脐总神经传导检测:刺激电极置于中踝及胖骨小头下,频率为*OHZ, 记录电极置于趾短伸肌进行记录CMAP。 胖肠神经传导检狐:刺激电极常规法置于外踝,记录电极置于胖肠肌上 记录感觉神经动作电位卜ensihve nerve action POtentials,SNAPsX频率为 1. OHz。 (三)腔神经H反射检测 刺激电极置于胭窝。采用频率为0.SHz,时限为0.Zrns,脓肠肌记录电 极记录H波和贝波。 “结 果 一、动物实验结果: ·2· 实验组O20mg/kg组入共取出胎鼠 592只,出现马蹄内翻足为 318 .q (53.7助)。其中第 17d 为 33.5呢、第 19d 为 54畅、第 21d为 73.7%。胎鼠 单足发病占79.3%,双足为20.6畅;对照组共取出胎鼠186只,无畸形出 现。畸形严重程度以第 ZId组为重。其他相关畸形尚有颌面畸形\脊柱裂 等。畸形足发生了旋转改变,足跃向内、足的后外侧缘着地,踝角则明显增 大呈马蹄内翻位,在严重病例中踝角可达175、 (一)光镜观察结果: O)对照组:第17d组见距骨和跟骨不在同一平面,距骨内倾且背屈, 跟骨偏外。第19d组距骨内倾程度较轻。矢状位显示距骨、跟骨部分重叠。 第 21组解剖结构同人类相似,横断面可见跟腥位跟骨后侧;矢状位显示距 骨、跟骨明显重叠。 K)实验组:第17d组见小腿肌肉较对照组萎缩,附骨小且失正常形 态。距骨、跟骨在同一解剖面,两者被间叶组织分割。距骨较对照组小、滑 车较平,跟骨内翻,跟腥内倾。第19d组见距骨变小、滑车较平。矢状位显 示距骨、跟骨重叠不足;跟骨内翻较前严重,附骨小且失形态。脊髓前角神 经元减少,胶质细胞增加。第 Zld组见踝关节呈马蹄,距骨变小、滑车变平; 前足切片见胶骨和跑骨在同一解剖面,跟骨内翻严重且距、跟骨间重叠不 良,跑骨小且失形态。脊髓前角神经元明显减少,胶质细胞增加。 (二)实验组透射电镜观察 第19d组:小腿和足软骨及肌肉细胞中有变性、凋亡现象,距骨表面软 骨


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