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SIRS大鼠心肌G蛋白、G蛋白mRNA表达的变化及地塞米松对其作用的实验研究

梁丽  
【摘要】: 前言 多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)是危重患者主要的死亡原因之一,其机制尚不十分明确。目前认为全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)可能是MODS最主要的病理学基础和根本原因。SIRS发生时,循环系统也是较易受影响、受损害的系统之一,可表现出不同程度的心功能障碍。β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)介导的细胞信号转导系统中的G蛋白的异常可能参与了SIRS时心功能障碍的发生。糖皮质激素具有抗炎、抗毒的作用,许多文献报道用于治疗脓毒血症、感染性休克取得了一定的效果。本实验通过注射内毒素,制造SIRS大鼠模型,观察β-AR系统中G蛋白及其mRNA表达的变化以及地塞米松对G蛋白的影响,以探讨G蛋白在SIRS时发生心功能障碍中的作用,以及地塞米松对G蛋白的变化有何影响,为临床防治SIRS和MODS的发生、发展提供理论依据。 材料与方法 1.动物模型的制备 腹腔注射内毒素(20mg/kg)制成大鼠SIRS的动物模型。32只大鼠随机分为内毒素注射后3小时组(3.0h组)、内毒素注射后6小时组(6.0h组)、地塞米松治疗组(DXM组)、正常对照组。DXM组在给予LPS后10分钟给药,20mg/kg腹腔注射,观察时间为3小时,与LPS3.0h组进行比较。 2.标本采集和处理 每组各取8只动物于无菌条件下取材,分 别于 3 /J’时或 6 /J’时剖开大鼠胸腔,迅速取出心脏,置于 Eppen- d耐管中,-80t冻存备用。于注射内毒素前后球后静脉丛采血 送检。 3.实验方法 门)免疫印迹法测定大鼠心肌Gsa蛋白Oa蛋白含量的变 化。 橱)逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法研究大鼠心肌 Gsa蛋白、Gia蛋白mRNA的表达。 u)生化方法检测大鼠心肌酶谱CK-MB值。 k)统计学分析所得数据以均值。标准差k)表示,样本 均数比较采用 t检验,P<0.05认为差异有显著性。 结 果 l.与对照组相比,LPS3.oh组、LPS6.oh组大鼠,G’肌Gsa蛋 白含量的下降均有显著性差异(P<o.01人尤以U七宝.0组明显。 **M组与鹏3.0组比较,略有上升,但差异无明显的显著性p> 0.05)。 2.与对照组相比,LPS3.oh组、LPS6.oh组大鼠心肌Gia蛋 白的相对含量的升高均有显著性差异(P<o.05,P<o.0*,尤以 LPS6.0组明显。DXM组与LPS.0组比较,略有下降,但差异无明 显的显著性u>O.05人 3.LPS3.oh组、LPS6.oh组大鼠心肌Gs。蛋白mRNA表达 的改变与对照组相比,均有显著性差异,P均<0.of,尤以 LPS6.0 组下降明显。DXM组与LPS3.0组比较,略有回升,但差异无明显 的显著性(P>0.05)。 4.LPS3.0 h组、LPS6.oh组大鼠心肌Gia蛋白InRNA表达的 改变与对照组相比,均有显著性差异,P均<0,of,尤以 LP%.0 组升高明显。DXM组与LPS,0组比较,略有下降,但差异无明显 ·2· 的显著性(P>O.05)。 5.SIRS大鼠心肌酶谱CK—MB值Lp3.oh组、LPS6.oh组分 别与对照组比较,结果有显著性差异f均<o刀\尤以口o仅对组 明显,DXM组与LPS3.0组比较,CK-MB值略有下降,但差异无 明显的显著性瞩>O.05人 结 论 1.SIRS大鼠随着病情的不断进展,心功能受损逐渐加重。 2.SIRS大鼠心功能障碍时,心肌细胞膜上的GS。功能受损, 含量下降,同时其表达也降低,而Gia蛋白的含量升高,其表达增 强,表明SIRS大鼠心肌细胞信号转导系统中的G蛋白发生异常, 此种异常改变是在基因水平上发生的,并且参与了心功能障碍的 发生、发展。 3.地塞米松对SIRS大鼠心肌G蛋白的改变没有明显的作 用。


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