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结直肠癌血清p53抗体与肿瘤P53蛋白表达及临床病理特征的相关性研究

张宏  
【摘要】: 目的 近年文献资料显示60%~70%的结直肠癌发生P53基因突变,而且突变频率与肿瘤的恶性生物学行为相关。检测P53基因突变的金标准方法是DNA分析,然而由于其操作复杂,不适合临床常规应用。肿瘤细胞P53蛋白免疫组化染色是当前应用最广泛的判定P53基因突变技术。然而其缺陷是需要针对肿瘤组织标本才能检测,因而有一定局限性,而且假阳性率和假阴性率较高。近几年研究发现血清p53抗体与P53基因突变显著相关,从而开辟了检测P53基因突变的新途径。而且血清学检测p53抗体这一方法还具有取材方便、性质稳定、操作简便的优点,更受到众多学者的瞩目。本研究中,我们通过对结直肠癌病人血清p53抗体的定性检测,分析其与肿瘤组织P53蛋白表达的相关性,评价其能否间接反映P53基因的突变。同时通过分析血清p53抗体与结直肠癌临床病理特征的相关性以及比较血清p53抗体、CEA及CA19-9在结直肠癌中的阳性率,探讨其作为一种新的肿瘤标志物的临床意义。此外,我们还通过比较手术前后血清p53抗体的变化,进一步评价其在判定疗效,监测预后中的作用。 方法 选择2002年4月~2003年1月间在日本金泽医科大学一般消化器外科手术治疗的132例结直肠腺癌病人和同期36例非肿瘤病人为研究对象。结直肠癌术后吻合口复发或伴有其他脏器原发癌肿的病人不在本研究之内。所有病例术前未采取化疗和/或 放疗,术后经病理组织学检查证实诊断。采用EIJSA法定性检测 血清p53抗体。由医院中心检验科采用放射免疫分析法(RIA)统 一测定血清CEA和CA19-9。结直肠癌标本p3蛋白免疫组化 染色采用链菌素抗生物素蛋白一过氧化酶法乃一P法人统计学 分析采用 StatView version 5.0.二统计软件处理,P<0.05认为差异 有显著性。 结 果 结直肠癌组中 53例(40.2%)血清 P53抗体呈阳性,而对照组 仅二例p.9%)阳性,两组间有显著的差异J<o.删1。尽管 CEA和 CA19-9在结直肠癌病人中的阳性率分别为 18.2%和 12.9%,但是与对照组比较无显著性差异*EA,P二 0.0634;CA19 -9,P=0.0824)。结直肠癌组中 75例(56.8呢)肿瘤 p3蛋白免 疫组化染色呈阳性反应,其中弱阳性18例,阳性31例,强阳性26 例。在53例血清P53抗体阳性的病人中有sl例p6.2%)M3蛋 白染色阳性,而 79例血清 P53抗体阴性的病人中仅 24例问0. 4%B 蛋白染色阳性。统计学分析显示结直肠癌病人血清 P53 抗体阳性率与肿瘤组织63蛋白免疫组化染色阳性反应呈显著相 关p<o.删1人血清中 抗体的出现与结直肠癌病人的年龄, 性别及肿瘤的大小、位置、大体形态无关,而与肿瘤的分化程度,有 无肝脏转移或淋巴结转移及Duke、分期有关。血清P53抗体的 阳性率在高分化腺癌为门%,中分化腺癌为42%,低分化腺癌为 64%,P二 0.0007。肝脏转移病人的血清 P53抗体阳性率显著高于 无肝转移组病人门%VS 37%,P=0.0098人在淋巴结转移的病 人,血清P53抗体的阳性率为52%,而没有淋巴结转移的病人中 阳性率为 33%,P=0.0261。在不同的 Duke\ p中,血清 p53抗 体的阳性率分别为 A期 14%,B期 30%,C期 44%,D期 78%,差 ·2· 异有显著性,P=0.0013。血清 P53抗体阳性的 53例病人中,术后 1个月有39例(7%)抗体转阴。其中姑息性手术组3例问3%* 而根治性切除组36例u2%八二组间有显著性差异,P=0.0026。 术前CEA阳性的24例病人中,术后1个月有13例问4%)转为阴 性。其中姑息性手术组 2例一%人而根治性手术组 11例 (85畅),差异有显著性,P=0.00if。术前CA19-9阳性的17例 病人中 7例肝%)在术后 1个月转为阴性。在姑息性手术组和 根治性切除组的转阴率分别为20%p例)和71%阳例太差异有 显著性,P二 0.034。 结 论 本研究显示血清p53抗体在结直肠癌中的阳性率为40.2%, 在对照组的非肿瘤患者中为2.9%。这一结果充分说明血清p53 抗体和结直肠癌有显著的相关性,可以作为诊断的辅助指标之一。 同时我们还发现CEA和CA19-9的敏感性较低,在结直肠癌组的 阳性率分别为18.2%和12.9%,而且阳性率在结直肠癌组和对照 组间的差异无显著性,从而再次证实CEA,CA19-9这些简易的 肿瘤标志物对结直肠癌没有诊断价值。我们的研究还表明结直肠 癌血清P53抗体的出现与肿瘤P53蛋白的阳性表达有显著的相关 性,血清P53抗体的出现可以反映肿瘤细胞P53基因突变,检测血 清p53抗体是间接判定P53基因突变的一种可靠而简便的方法。 本研究发现血清P53抗体可以出现在结直肠癌Duke\分期的早 期阶段,其中在A期的阳性率为14%为期的阳性率为30%,并且 随分期的进展,阳性率呈升高趋势。由于内窥镜检查费用高,程序 复杂,而且属于有创伤性操作,不适合于临床筛检,因而血清p53 抗体有可能作为一种新的肿瘤标志物对结直肠癌高危人群进行临 床筛检,从而有助于早期诊断。此外,本研究表明血清P53抗体还


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