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系统性红斑狼疮患者血清IL-15检测及其对肾损伤的评价

张榕  
【摘要】: 前言 系统性红斑狼疮患者体内存在复杂的细胞因子网络功能失常,细胞因子在系统性红斑狼疮发病机制中发挥了重要作用。IL-15分子量为14-15KD,其通过IL-2受体的β和γ链和自身独特的α链调节其功能,这决定了IL-15的多种生物学活性,其能诱导T细胞趋化、增殖、减少T细胞凋亡。IL-15还可使中性粒细胞活化、细胞骨架重建、延缓其凋亡及增强其吞噬功能,并增加NK细胞源性细胞因子的产生、联合刺激增殖和分化产生IgM的B细胞。IL-15比IL-2更早参与宿主早期的免疫反应。在几种免疫功能异常的疾病如类风湿性关节炎、活动性溃疡性结肠炎中均表现IL-15水平的异常升高。 系统性红斑狼疮作为一种全身多脏器受累的自身免疫性疾病,其发病机制不十分清楚,我们通过检测系统性红斑狼疮患者血清中IL-15的水平,探讨其与疾病活动性、肾受累及病情严重程度的关系。 实验材料及病例选择 MODEL 550酶标仪 鼠抗人IL-15单抗包被的酶标板,生物素化的抗人IL-15抗体,辣根过氧化酶标记链霉亲和素。 46例初诊系统性红斑狼疮患者诊断均符合1982年美国风湿 病协会修订标准,其中女40例,男6例;年龄14-61岁,平均年龄 32.59。10.99岁;确诊前均未用过激素及免疫抑制剂类药物。选 择 20例健康献血员作为正常对照组,其中女 15例,男 5例,年龄 20-45岁,平均 27.5 LIZ.6岁。 实验方法 采清晨空腹静脉血Znil,离心后取上清,置PC管中一20I保 存同批检测。同时检测其他临床相关指标。血清 IL-15的检测 采用ELISA法:鼠抗人几一15单抗包被的酶标板平衡至室温后, 分别将各浓度的100ill标准品、空白对照及血清样品加人相应反 应板孔中;轻轻混匀30秒,37(温箱孵育20分钟;用洗涤液反复 洗涤5次;每孔加人50al生物素化抗人IL-15抗体和50ul辣根 过氧化酶标记链霉亲和素,轻轻混匀30秒,37 C温箱孵育20分 钟;再次洗板同前;每孔加人底物缓冲液A和B各50ul,轻轻混匀 10秒,室温温育3分钟;每孔加人50al终止液,轻轻混匀30秒;30 分钟内在450urn处读取OD值;绘制标准曲线,根据血清样品的 OD值可在标准曲线上查出其浓度。用SAS统计处理软件对数值 进行t一检验及相关分析。 实验结果 且.系统性红斑狼疮患者血清见一5水平升高门9.07。N.3O Pg/Inl)与正常对照组k.77。4.15Pg/Inl片较差异十分显著门一 4.7772,P<0.00),狼疮肾炎组(24.74。22.03 p牙M)与非肾炎组 ”.40。6.3 8 p牙rnl)血清见一15水平均高于正常对照组门 N. 00,P①.05人尤其以狼疮肾炎患者血清L一 升高最为明显,其 与狼疮非肾炎组比较差异也十分显著门一3.5059,P川.01八L将 非肾炎组按有无度损分为皮损组 7例门.25。7.54pg/rnl)和无皮 ·2· 损组 10例K.71j.86pg/llil人两者血清o河 水平比较无统计 学意义门一一2.109,P>0.05);3.5m患者血清IL 一15水平与 SLEDAl总体分值之间无相关关系(r=0.282,P )0.05);4.Sm患 者血清IL八 水平与抗ds-DNA抗体产体均具有相关性卜一 0.4701,P(0.of,r=-0.33 12,P(0.05);5.狼疮非肾炎组血清见 一15与尿民一MG呈明显的正 相关关系(r=0.793,P<0.of);6二 SLE患者随着治疗的好转,血清 IL叫 水平也随之下降。 讨 论 系统性红斑狼疮患者体内B淋巴细胞的过度激活产生大量 的自身抗体,同时伴有T淋巴细胞的功能调节异常,其原因可能为 Thl/ThZ细胞分泌的细胞因子平衡失调所致。我们发现SLE患者 血清IL-15水平较健康对照者明显升高,国外研究发现极微剂量 的几一15就可增加bCI-2基因的表达,而bCI—2基因已证实可 抑制淋巴细胞的凋亡,使外周I3身反应性B细胞克隆的清除减少 导致SLE患者体内自身抗体的生成增多而促使系统性红斑狼疮 的发生发展。许多文献已报道IL则 能促进和增强TNF-a*L -l*L-6等细胞因子的产生,而这些因子目前已证实与SCh的 疾病活动性相关,我们发现IL叫5与抗他一DNA抗体市体呈明 显的相关关系,证实血清IL叫、5水平与SCh病理损伤,特别是免 疫复合物介导的血管炎性损伤可能具有重要的相关性。 在研究中,我们将狼疮肾炎组血清 IL-15水平与非肾炎组比 较差异显著,说明 IL-15可能参与了狼疮肾炎的发生发展。首 先,IL刁5通过增加 bCI-2基因的表达而使自身反应性T细胞持 续存在,产生的抗金一DNA抗体持续在肾脏沉积,激活补体,引起 肾脏损伤,而这正是狼疮肾炎发病机制之一;另外,国外研究也发 现人的肾小管上皮细胞是产生IL-15的主要根源,尤其在以免疫 介导的肾脏疾病中,不仅有 IL·d InRNA的表达而且有相同剂量 ·3· 的儿一15的分泌,正是肾小管上皮细胞分泌的L-15导致肾间 质中淋巴细胞的活化和增殖,进而引起间质损伤,其中尿p。-MG 作为临床中提示有


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