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人海马区血管构筑及鼠海马缺血再灌注损伤抗氧化治疗的实验研究

刘文瑞  
【摘要】: 人海马区血管构筑及鼠海马缺血再灌注损伤抗氧化治疗的实验研究 目的 研究人海马微动脉特征、微血管构筑特点,为海马缺血性疾病提供预防和诊治的实验依据。探讨人海马区(海马前区、海马内侧、海马后区、海马头、体、尾)血供形态学特点,为海马区血管介入治疗或外科手术的入路提供理论依据。Thioredoxin是具有还原活性的小分子蛋白,探讨Thioredoxin对鼠海马缺血再灌注损伤的抗氧化治疗作用。 方法 1.以墨汁甲醛混合液,经颈总动脉灌注新鲜尸体,直至全身皮肤、眼结膜黑染。静置三天,取脑,外固定七天。切去小脑、端脑,沿脉络裂小心切除间脑及脑干,保护好海马及其血管。在颞中平面,冠状切取3mm厚两块组织,石蜡包埋,制作150μm连续切片,HE染色,光镜下观察微血管构筑特点,图像分析仪测微及统计学处理数据。 2.以甲基丙烯酸甲酯,经颈总动脉灌注新鲜尸头,浓盐酸腐蚀,蒸馏水冲洗,扫描电镜观察人海马微动脉系统特点并测微。 3.对14具用福尔马林灌注固定的成人尸体进行红色乳胶颈总动脉灌注,常规取脑,在6~20倍手术显微镜下,清除海马区蛛网膜、静脉及其属支,保护显示动脉,追踪动脉来源、分布,以游标卡尺(0.02mm)测量动脉起端外经。 4.8周龄BALB/c雄性小鼠随机分成4组,即对照组5只,假手术对照组5只,手术对照组6只,手术治疗组6只。手术组动物,双侧颈动脉夹闭15分钟后再灌流,经颈动脉给与手术治疗组10μg Thioredoxin/只,手术对照组则给与等体积生理盐水溶液。动物存活24小时。连续冠状脑切片,测定海马缺血梗塞体积。Western Blotting分析海马内蛋白氧化量。Real-time RT-PCR分析海马内c-Fos mRNA表达量。 结果 1.光镜下观察,墨汁甲醛混合液灌注的海马切片,图像分析仪测微并 处理数据。发现海马齿状回的微血管与海马齿状回的细胞构筑层次相适 应,分深浅两层。浅层滋养海马齿状回神经元顶树突,与分子层相当。深层 滋养海马齿状回神经元胞体与锥体细胞层或颗粒细胞层相当。我们观察到 海马穿动脉进人海马齿状回后,成树枝样分支,并与海马齿状回神经功能柱 的形态相适应,进人并滋养神经柱,组成海马齿状回血管神经柱。对齿状 回、海马CAZ、CAI区的微血管密度进行了图像分析和统计学数据处理,我 们发现,齿状回神经功能柱的深层血管密度最大为,0.365士0. 018林才/林 mz,CAI区的深层血管密度较小为,0.246土0.017脚2/林扩。 2.海马微血管铸型腐蚀标本,扫描电镜观察,海马微动脉包括海马的 穿动脉、毛细血管前微动脉、中间微动脉和后微动脉;它们的外径分别是: 200一60林m,80一30林m,30一20林m,20一10协m。它们的铸型标本在扫描电 镜下分别可见环形、串珠样和竹节样平滑肌压迹。 3.海马前区一前穿质区有来自大脑前动脉、大脑中动脉及脉络膜前动 脉的近中段的中央穿支,共7一12条,口径为0.51一0.77Inm,与杏仁体、海 马头紧密相邻,集中成排地钻人脑实质。 海马内侧一颖叶与脑干间空隙内有大脑后动脉及其分支:丘体动脉、 脉络膜后内动脉、脉络膜后外动脉和丘脑膝状体动脉。它们走行、较长,口 径较粗,内侧环绕脑干,外侧贴邻下托、齿状回和海马。 海马后区一四叠体区有丘体动脉、脉络膜后内动脉的3一6条终支,口 径为0.31一0.42~;配布在上下丘和松果体外缘,与海马尾密切相邻。 海马本部(海马头、体、尾)血液供给。本实验研究的28个脑半球中, 共有130条动脉供给海马。平均每个海马有4.64土0.73(3一6)条,每条平 均口径为0.46士0.13(0.28一0.90)llnn。海马的血供是多源的,主要来自 脉络膜前动脉和大脑后动脉及其分支,它们的出现频率和口径见附表。 海马头动脉供给本研究发现28个海马头共有52条动脉供血。其中 21条来自脉络膜前动脉,巧条来自大脑后动脉,16条来自颜下前动脉。平 均每个海马头有1 .86土0.45(1一3)条动脉供血,每条动脉口径为0.44士0. 12(0 .30一0.80)nun。 脉络膜前动脉在海马旁回钩的半环沟〔’}内分出海马动脉,经钩切迹in- cisura皿ci(海马沟前端)深人海马沟内,由腹内侧走向背外侧,滋养海马头 和齿状回尾。大脑后动脉或颖下前动脉分出的海马动脉在钩的后方游离端 钻人深处,沿着齿状回尾由背外侧走向腹内侧,与脉络膜前动脉的海马头支 吻合成环,再发出细支滋养海马头和齿状回尾。 附表28例脑半球海马动脉起源、频率及口径 海马动脉来源 海马动脉条数 (%) 海马动脉直径 (见土:,~) 脉络膜前动脉 大脑后动脉 颖下前动脉 颜下中动脉 颖下后动脉 颖下总动脉 顶枕动脉 距状沟动脉 脉络膜后外动脉 含海马动脉脑 半球数(%) 21(75 .00) 17(60 .71) 20(7 1 .42) 3(10.71) 8(28 .57) 2(7 .14) 18(64 .28) 1(3 .57) 7(25 .00) 21(16.15) 30(23 .08) 24(18.46) 4(3 .08) 14(10.77) 4(3 .08) 18(13.85) l(O,76) 14(10.77) 0 .41土0.14(0.30一0.80) 0 .49土0.16(0.30一0.90) 0 .48土0.12(


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