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基质金属蛋白酶9在胎膜早破的表达和作用

任静  
【摘要】: 前言 胎膜早破(PROM)是威胁母儿健康的产科常见并发症,近年来胎膜早破的发生有增加倾向,是当前产科临床处理较棘手的问题之一。胎膜早破的发生率为12.4%;足月前胎膜早破(PPROM)的发生率为2-3.5%。足月前胎膜早破的30%-40%孕妇发生早产。胎膜早破发生后,感染、早产、脐带脱垂、胎盘早剥、羊水栓塞、羊水减少、胎儿窘迫等并发症的发生率明显增加,大大增加了围生期母儿的发病率和死亡率。 胎膜早破是由于加速细胞外基质(ECM)降解,膜张力减弱引起的。有四类水解酶参与细胞外基质降解,分别是丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶,而基质金属蛋白酶是其中最重要和最复杂的一类酶。基质金属蛋白酶9(MMP-9)是基质金属蛋白酶家族的一员,是分子量最大的依赖锌的酶,激活后能降解Ⅳ型胶原、变形的胶原纤维和层粘连蛋白、弹性蛋白等细胞外基质。Ⅳ型胶原是羊膜绒毛膜基底膜的主要成分,维持胎膜的张力。MMP-9降解Ⅳ型胶原,胎膜张力减低,最终导致胎膜早破。最近的研究表明,羊膜上皮细胞和绒毛膜滋养细胞产生MMP-9,羊膜上皮细胞层和绒毛膜滋养细胞层MMP-9的诱生降解了基底膜的细胞外基质,导致细胞分离和凋亡。 本实验通过研究MMP-9在发生胎膜早破和非胎膜早破时羊膜绒毛膜的表达差异,可能为进一步阐明其在胎膜早破的发生机制提供依据,为临床上应用其拮抗剂阻断胎膜早破的发生提供可能,从而降低因胎膜早破而增加的产科并发症。 材料和方法 胎膜早破(PROM)组羊膜绒毛膜组织取自中国医大二院产科病房30例不明原因发生胎膜早破的产妇,非胎膜早破组羊膜绒毛膜组织取自16例不明原因发生早产的产妇,10例足月产的产妇。标本取自2003年2月- 2003年10月。病例选择无产科并发症和合并征,头位单胎,自然分娩的初 产妇。分娩后剪取胎膜破裂口周围1 xl.SC扩的胎膜,之后在平衡盐水溶 液中清洗三次,然后除去附着的血污,除去蜕膜,置于10%甲醛溶液中,石 蜡包埋,切片备用。 实验方法 采用免疫组化链霉菌生物素蛋白一过氧化酶连接法(SP法)检测30例 胎膜早破组和16例胎膜完整的早产组和10例足月产组羊膜绒毛膜上基质 金属蛋白酶9的表达特点和综合光密度A值。石蜡切片脱蜡,0.3%HZ仇 封闭内源性过氧化物酶,滴加一抗山羊抗人MMP习多克隆抗体,滴加二抗 兔抗山羊IgG后,滴加酶标底物(辣根酶标记链霉亲和素),DAB显色,苏木 素复染。同时设空白对照,采用PBS代替一抗,其余步骤同上。细胞浆内 有棕黄色颗粒沉着为阳性表达再用病理图象分析系统,测定显色区的综合 光密度值,应用t检验进行资料分析。 结果 MMP一在胎膜早破、早产(PLT)、足月产羊膜绒毛膜上均有表达,定位 于细胞浆内,呈棕黄色颗粒沉着,MMP一在发生胎膜早破时羊膜绒毛膜上 高表达,在无胎膜早破的早产和足月产羊膜绒毛膜上低表达。应用病理图 像分析系统测定MMP一9光密度A值,测定结果如下:妊娠31周一33周十“, PROM组MMP一9光密度A值为0.396157*0.0207746,PLT组是0.358425 土0.0065067,PROM组和PLT组差异有显著性(P二0.002)。妊娠34周- 36周+6,PROM组MMP习值为0.396594士0.0371063,pLT组是0.354639 士0.0043234,差异有显著性(P=0.027)。妊娠37周一42周,PROM组 MMP习值为0.397073土0.0316304,正常产组是0.363459土0.0097148, PROM组和足月产组差异有显著性(P二0.005)。 结论 1.MMP一在发生胎膜早破时羊膜绒毛膜上高表达,在无胎膜早破的早 产和足月产羊膜绒毛膜上低表达。 2.发生胎膜早破时MMP一的综合光密度A值显著高于非胎膜早破的 MMP一9综合光密度A值,说明羊膜绒毛膜上MMP一的显著增高可能促使 胎膜早破的发生。


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