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铅和乙醇对雄性大鼠生殖系统联合作用的实验研究

谭成森  
【摘要】: 前言 目前铅和乙醇对人类生殖功能的危害受到广泛的重视,国内外对其进行了一些研究,结果表明,铅和乙醇均能引起人和实验动物精子总数减少,精子畸变率升高,精子活动无力,雄性激素水平下降及生殖能力减低。 铅与乙醇均是接触频率大,暴露人群广泛的化学毒物。但目前绝大多数的研究都是针对铅或乙醇的单独毒性作用,而对二者的联合作用则报道很少。在铅作业工人中,特别是在阴冷潮湿环境及大强度体力劳动时,许多工人尤其是青年工人多有嗜酒行为。又有调查显示,饮酒者发生铅中毒的比例较高。 睾丸是主要的雄性生殖器官,化学物质可以影响睾丸的生精过程及改变间质细胞和支持细胞的功能,对睾丸产生直接毒作用,还可以通过影响下丘脑-垂体轴的性激素分泌水平对睾丸产生间接毒性作用。 本研究采用整体动物实验的方法,通过观察铅和乙醇联合作用对大鼠睾丸所致的脂质过氧化作用,睾丸生殖细胞的凋亡情况,精子数量和质量,以及血中性激素水平的影响,探讨铅和乙醇对雄性生殖系统的联合毒作用方式及其作用机制。 材料与方法 1.动物分组及染毒 成年Wistar雄性大鼠32只按体重随机分为四组:(1)对照组(2)醋酸铅组(5‰醋酸铅染毒)(3)乙醇组(按2.16g/kg剂量染毒,相当于1/5LD_(50))(4)醋酸铅(5‰)+乙醇(2.16g/kg)组。 2.观察指标与检测方法 2.1睾丸和附睾系数的测定 脏器系数=(脏器重量/体重)×100% 2.2血铅含量测定—原子吸收石墨炉法 2.3攀丸的脂质过氧化作用检测: 2.3.1皋丸组织脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量检测一硫代巴比 妥酸法 2.3.2皋丸组织还原型谷胧甘肤(GSH)含量检测一DTNB直接法 2.3.3攀丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活性检测一SOD试剂盒 2.4精子检查 按常规方法对精子数,精子畸形及精子活动度进行检查 2.5血清性激素水平测定 应用放射免疫技术对血清中皋酮(T)和黄体生成素(LH)水平进行测 定。 2.6皋丸Fas蛋白表达检测一免疫组化技术 3.数据处理 用统计软件SPSS10.0对各项指标的实验数据进行均值计算,各组间进 行单因素方差分析。其中血铅的浓度用几何平均数表示。 实验结果 1.大鼠体重与辜丸、附肇系数 体重、附肇系数各组间未见显著性差异(p0.05)。联合组的皋丸系 数显著低于对照组(p0.05)。 2.血铅浓度 联合组与染铅组的血铅浓度显著高于对照组和乙醇组(p0.05)。联 合组的血铅浓度虽高于染铅组,但未见显著性差异。 3.皋丸组织的脂质过氧化指标 各剂量组与对照组之间GSH含量均无显著性差异(p0 .05)。各剂量 组MDA水平与对照组比较差异显著(p0.05),而联合组与铅和乙醇单独 作用组比较亦显著升高(p0.05)。各剂量组SOD活性与对照组比较显著 降低(p0.05),联合组与铅和乙醇组比较,亦显著降低(p0.05)。 4.精子检查 各剂量组与对照组比较,精子数、活精率均显著性降低(p0.05),联 合组的活精率与铅和乙醇单独作用组比较也显著性降低(p0.05)。 5.血清性激素水平测定 血清攀酮浓度铅组和乙醇组与对照组比较显著升高(p0.05),而联 合组与其余各组比较显著降低(p0.05)。血清LH铅和乙醇组与对照组 比较显著降低(p0.05),亦显著低于联合组(p0.05)。 6.皋丸细胞调亡情况 各实验组Fas蛋白表达阳性率与对照组比较显著升高(p0.05),且联 合组显著高于铅和乙醇单独作用组(p0 .05)。 讨论 1.铅和乙醇对雄性大鼠生殖系统的单独作用 流行病学调查和动物实验结果均显示,铅和乙醇对雄性生殖系统都具 有损害作用。对人和动物的研究均已证实,铅和乙醇对精子的数目、活动 度、形态及功能均可造成明显的损害。此外,铅和乙醇对生殖内分泌、前列 腺、性功能和性征也可造成影响,从而引起生殖功能的紊乱。 本研究的结果与文献的报道基本一致:铅和乙醇单独作用组与对照组 比较,精子数、活精率、SOD活力、血清LH水平均显著降低,血铅浓度和生 殖细胞凋亡数显著增加。该结果进一步证实了铅和乙醇对雄性大鼠生殖系 统的毒性作用。 2.铅和乙醇对雄性大鼠生殖系统的联合作用 本研究发现,铅和乙醇单独作用组的皋丸系数与对照组比较,未见显著 性差异,但其均值有增大的趋势。联合组辜丸系数与对照组比较,·显著升 高。表明铅和乙醇对皋丸系数影响具有协同作用。 本研究中精子数量与质量变化检查发现,·铅组、乙醇组和联合组精子计 数与对照组比较显著减少,联合组与铅和乙醇单独作用组比较虽然没有显 著性差异,但从其均值可看出有减小的趋势。精子活动度分析可以看到联 合组与其余各组比较显著下降。这些结果表明铅和乙醇对大鼠精子的影响 具有比较明显的协同作用。 在许多化学物对机体的毒作用机理中,氧自由基介导的脂质过氧化作 用占有重要地位。本研究中铅组、乙醇组和联合组的丙二醛(MDA)含量明 显高于对照组,而联合组与铅、乙醇组比较,亦显著升高。超氧化


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