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饮食诱导雄性肥胖大鼠GH/IGF-Ⅰ轴变化的探讨

郑琳琳  
【摘要】: 前言 由于生活水平改善引起脂类物质摄入的增加,肥胖在全世界范围内流行且日趋严重,我国城市学龄前儿童肥胖率正以9.1%的年增长率逐年递增,肥胖已成为全球关注的健康问题。肥胖发生后导致机体激素及生物因子水平产生很大变化,包括瘦素(leptin)、胰岛素(insulin)、神经肽Y(NPY)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等的水平显著升高。 正常生理状态除妊娠期外,生长激素(growth hormone,GH)与其受体结合刺激肝脏及脂肪组织等靶组织分泌胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ),IGF-Ⅰ随着GH的上升而增高。但当IGF-Ⅰ达到一定水平时可以反馈性刺激下丘脑释放生长抑素(growth hormone release inhibiting hormone,GHRIH),或直接负反馈抑制腺垂体细胞GH的分泌,避免GH水平继续升高,因而被称为GH/IGF-Ⅰ轴。大多数GH的作用是通过IGF-Ⅰ介导来实现的,GH在IGF-Ⅰ的介导下促进软骨细胞增殖及骨化,使长骨增长,机体长高。然而在肥胖时,血清中GH水平降低,而总的IGF-Ⅰ水平正常或升高,伴随游离IGF-Ⅰ水平正常或升高。 本研究致力于探讨IGF-Ⅰ在血中正常或高水平的成因,GH/IGF-Ⅰ的轴性变化。 目的 1.探讨高脂饮食诱导肥胖大鼠血中GH、游离IGF-Ⅰ水平与对照组比较是否有显著性差异; 2.探讨高脂饮食诱导的肥胖大鼠肝脏IGF-Ⅰ的含量与对照组是否有显著性差异; 3.探讨胰岛素与IGF-Ⅰ的关系; 4.探讨GH/IGF-Ⅰ的轴性变化。 实验材料与方法 实验材料 1.实验动物:初断乳的雄性Wistal大鼠,55士59,共32只。购于中国医 科大学动物部。 2.GH、IGF一I放射免疫分析试剂盒均购于天津九鼎医学生物工程有限 公司。 3.胰岛素放射免疫分析试剂盒购于中国人民解放军总医院放免研究 所。 4.IGF一I免疫组化试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。 5.饲料配方和主要营养成分: 基础饲料配方(1009):豆柏259、黄豆59、玉米309、酵母2.59、鼓子 109、鱼粉109、骨粉2.59、高粱59、标准粉8.59、豆油19、盐0.59。 高脂饲料配方(1009):基础饲料449、鸡蛋2鲍、奶粉159、猪油159、鲜 黄豆芽59、鱼肝油19。 实验方法 1.动物的分组与饲养 32只大鼠适应性饲养1周后,随机分为2组,每组再随机分为2组,对 照组及高脂组各8只。对照组给予基础饲料,高脂组给予高脂饲料。动物 室温度22士5℃ 周记录一次。 ,相对湿度45%济’0%,自然光照,自由饮水和摄食,体重每 六「 尸、 2.标本的采集与处理 2.1血清实验的第6商、珍周末大鼠禁食12小时后处死,下腔静 脉取血5祖。采集的血样在室温下静置2小时后以3000rpm离心20分钟, 分离血清,密封,置于一70℃冰箱保存,待测。 2.2脂肪垫于实验的6、12周末处死各组大鼠,剖开腹部,取出肠系 膜部、肾周部和附皋部脂肪垫,称重。 2.3肝脏于12周末处死两组大鼠,剖开腹部,剥离肝周组织,迅.速 取出肝脏,固定,石蜡包埋后切片,待测。 3.指标测定 3.1激素测定方法:将血清按GH、IGF‘I和胰岛素放射免疫分析试剂 盒中的使用说明分别测定‘-.… 3‘2肝脏IGF一I测定方法‘:免疫组化方法,结果判定采用图像分析系 统刀 3.3血糖测定方法:邻甲苯胺法 .4.主要仪器:放射免疫分析仪器采用西安核仪器厂生产的FJ一2008Ps 型,放射免疫计数器;图像分析采用Metamorp丫DP10/BX51图象分析系统 型,由中国医科大学设备处提供。 5.统计分析 采用SPsSI 1 .5统计软件进行统计学分析,实验数据用又士s表示,两组 之间的比较采用student’st检验,分析高脂组大鼠血清胰岛素、胰岛素敏感 指数(151)与血清游离IGF一I的关系采用Pearson相关分析。 结果 ·1.实验过程中高脂组和对照组大鼠体重的变化 实验O周时两组体重无差异,对照组83.5士11.39,高脂组84.0士n.8 g(P0.05)。实验的6周末,两组的体重即出现差异,对照组体重281 .3土 26.59,高脂组体重323.3土22.09(P0.01)。对照组与高脂组体重的差异 一直持续到实验结束的12周末,对照组体重390.4土38:69,高脂组体重 446 .4士32.49(P0.01)。 2.实验中期(6周末)、末期(l2周末)大鼠处死时腹部脂肪储存状况的 比较 实验6周末时,高脂组与对照组比较,肠系膜部、肾周部的脂肪垫重量 均未出现差异,但附翠部脂肪垫重量已经出现差异(P0.05),总脂肪垫及 单位体重脂肪〔总脂肪(g)/体重(kg)〕无差异。实验结束12周末时,高脂 组的肠系膜部脂肪垫重量高于对照组(P0.05),附梁部、肾周部的脂肪垫 重量、总脂肪垫及单位体重脂肪重量均显著高于对照组(P0.01)。 3.实验中期(6周末)、末期(12周末)CH水平、IGF一I水平的变化 高脂组与对照组血清中GH、游离IGF一I的水平在实验6周时未出现 差异,在实验结束12周时,高脂组血清GH水平低于对照组(P0.05),高 脂组血清游离IGF一I水平高于对照


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