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大鼠脑出血后MMP-9的表达与脑含水量变化的关系

田力  
【摘要】: 目的 基质金属蛋白酶(MMPs)是一个含锌的细胞外基质(ECM)降解酶家族,参与正常的生理活动,对创伤愈合、血管生成有重要作用,同时也参与动脉粥样硬化、关节炎、肿瘤细胞的生发和转移及多发性硬化等众多病理过程。基质金属蛋白酶抑制剂因子(TIMPs)是它的内源性抑制剂,二者共同调节血管的渗透性。神经炎性反应时MMPs被过度激活,与TIMPs之间的平衡被打破,蛋白水解作用加强。近年来的研究表明,MMP家族中MMP-9对ECM的过度降解作用,与脑中卒后脑水肿的关系密切。ECM是一种以高度组织有序的方式构建而成的蛋白和蛋白多糖的多功能复合体,有助于保持器官系统内细胞和组织结构的完整性。ECM分子如Ⅳ型胶原、层粘连蛋白及纤维结合素、硫酸肝素等是血管周围基膜的主要成份。在脑内,血-脑屏障(BBB)主要由内皮细胞及其间的紧密连接构成,而基膜对它的结构支撑,在保持BBB的完整性方面起重要作用。ICH后,MMP-9被激活,通过对富含基膜的脑毛细血管床的过度降解作用,使得BBB遭到破坏,血管渗透性增加,炎性细胞浸润乃至神经元细胞死亡。本实验目的在于探讨大鼠脑出血(ICH)后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达和脑含水量的变化规律及意义。 方法 采用未抗凝新鲜自体股动脉血注入大鼠尾状核建立脑出血动物模型,模拟临床脑出血的自然状态。用酶谱分析法测定ICH后6h、12h、24h、48h、3d、6d、10d时程中MMP-9的表达,用免疫组化法观察24h时MMP-9表达的特征,用湿重-干重(wet-dry weight)法测定脑含水量的变化。 结果 在ICH后不同时间点进行动态观察发现血肿周围脑组织含水量于脑 出血后6h开始增加(P0.05),24h一72h达高峰(P0.01),此后渐减, 到6d基本恢复正常水平。酶谱分析显示MMP一9水平在ICH后6h提高 (P0.05),12h明显增加,24一48h达峰值(P0.01),此后下降,直到6d 时仍有一定活性(P0.05)。此外从免疫组化切片也可以观察到IcH后 24h在出血灶及其周围(包括脐服体和部分纹状体)脑组织均有MMP一9表 达,对侧半球及对照组均无表达。 结论 ICH后6h一3d出血灶周围脑组织中MMP一9的活性和组织含水量均 增加,MMP一9可能参与急性期脑水肿的形成。


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