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传统巴氏涂片法、液基制片法及HPV DNA检测法筛查宫颈癌及癌前病变的比较研究

高娜  
【摘要】: 前言 半个世纪以来,巴氏(Pap)涂片作为一种基本的筛查方法被广泛应用,对降低宫颈癌的死亡率发挥了重要作用,但是,由于取材、涂片中存在的一些问题,使宫颈癌的防治不尽人意,因此许多新的筛查方法争相问世。目前薄层液基制片法及HPV DNA检测法已应用于临床,文献中已有很多相关报道,但结论不尽相同。本试验对受检人群同时进行细胞学(传统巴氏涂片或薄层液基制片)和HPV DNA检测,以组织学诊断为金标准,以灵敏度、特异度、准确性等为评价指标,评价三种方法的临床筛查价值。 材料与方法 1.材料: 2002年8月~2003年6月间收集的184例病人,其中159例为中国医科大学附属第一医院妇科门诊宫颈病变中心诊断为阴道炎、慢性宫颈炎、宫颈湿疣、可疑宫颈病变及宫颈癌的患者,25例为病房行子宫切除的患者。 2.分组: 184例全部采用杂交俘获试验(HC2)行高危型HPV DNA检测,同时行细胞学检查,随机分2组,传统巴氏涂片(CV)组75例,AutoCyte液基制片(AC)组109例。年龄19-68岁,平均年龄40.3岁(CP组40.4岁,AC组40.2岁)。各种检测均双盲进行。 细胞学标本采集及处理: 3.1.传统巴氏涂片:以竹制Szalay刮板收集宫颈脱落细胞,制成玻璃涂片,95%酒精固定15分钟以上,巴氏染色。 3.2.液基制片法:本研究采用中国医科大学附属第一医院临床病理诊断中心引进的最新设备AutoCyte Prep system,利用专用采样器采集宫颈移行带区细胞,将标本直接洗入盛有AutoCyte保存液的小瓶中,经AutoCytePrep system处理后制成直径13mm的单层细胞涂片,95%酒精固定,巴氏染色。 4.细胞学诊断:传统巴氏涂片和液基制片诊断均依据TBS分级系统。 即正常范围(within normall俪ts,WNL);意义不明的不典型鳞状细胞(A- 帅1 cals四axnous eells of undetemuned 51即正cance,ASC一us);低度鳞状上 皮内病变(助w grade squ~usinti冠epitheli公lesion,LSIL),包括:Hry的细 胞变化、轻度非典型增生和CINI;高度鳞状上皮内病变(Hi沙,翻e闪u日L- mous intraepithelial lesion,HS几)包括:中度及重度非典型增生、原位癌、 CINZ和CIN3;鳞状细胞癌(squ~cell carcinorna,SCC);腺上皮不正常 为意义不明确的不典型腺细胞(At即ic滋妙叨d己ar cellsof川ldeten吐班刃s哈 n迅c ance,AGUS)和腺癌(adenocarcinoma)。本文中鳞状细胞癌和腺癌统称 为earcinoma(CA)。 5 .HPV DNA检测法标本采集及处理: 5 .1.标本采集:本试验采用第二代杂交俘获试验(HCZ),专用采样器采 集宫颈移行带区细胞,保存液中于4℃下冷藏,分别于广州医学院附属第一 人民医院及美国Digene公司,采用96孔平板法,利用13种(16,15,31,33, 35,39,45,51,52,56,58,59和68)高危型肿瘤相关I理V DNA混合探针试剂 盒进行检测。 5 .2.基本试验步骤:(l)碱性溶液破坏病毒使DNA双链被释放并分解为 核昔酸单链;(2)DNA单链与洲A探针结合为RNA一DNA杂交复合物;(3) 第一抗体(特异性抗体)将RNA一DNA杂交复合物固定在微孔壁上;闻结 合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与RNA一DNA杂交复合物结合,使信号放 大;(5)碱性磷酸酶使酶底物发光,判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量, 从而确定RNA一DNA杂交复合物的含量。 6.判定标准:组织学阳性诊断包括CINI以上病变,细胞学阳性诊断包 括ASCUS以上病变,RLUv公ue(相对光单位值)/Cuto任Va]Lue(阂值)值〕 1 .0时判定杂交俘获试验阳性(即HPV DNA阳性)。 7.分析方法:以阴道镜下宫颈活检或术后病理组织学诊断为金标准,评 价传统巴氏涂片法、液基制片法及HPv DNA检测法对宫颈癌及癌前病变 的筛查效率。分析内容包括:各筛查试验的灵敏度、特异度、准确性、阳性预 测值、阴性预测值等指标,显著性分析采用xZ检验,p0.05。_ 结果 1.检测灵敏度:Ac(90%)HCZ(87.7%)CV(64%),其中AC及 HCZ显著高于CV(P0.05) 2.检测特异度:AC( 88 .4%)CV(86%)HCZ(79.0%),但统计学上 无显著差异(P0 .05) 3.检测准确性:AC(89.0%)HCZ(82.1%)CV(78.7%),其中AC 显著高于Cv(P0.05)。 4.联合应用AC和HCZ的检测灵敏度、阴性预测值分别为97.5%, 98.2%,均高于AC(90%,93.8%)和HCZ(87.7%,92.2%)的单独检测(P 0.05)。 结论 1.本研究结果证实了目前文献提出的关于传统巴氏涂片的问题点,但 对于经济条件不具备的地区,此法作为防癌普查的基本方法仍有重要意义。 2.液基制片法显著降低了传统巴氏涂片的假阴性率,是较为理想的筛 查工具,应积极推广使用。 3.杂交俘获试验灵敏度显著高于传统巴氏徐片,但其存在较高的假阳 性率,所以不主张单独用于大规模筛查。 4.联合应用液基制片法和HPV DNA检测是有效的宫颈癌及癌前病变 的筛查方案。


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