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牛磺酸对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤保护作用的研究

张克忠  
【摘要】: 目的 缺血再灌注损伤是造成胰腺移植后各种并发症的主要原因之一,其中炎性细胞因子如TNF-α、IL-1β起关键作用,在保存液中加入各种细胞保护剂以减轻缺血再灌注损伤是器官移植研究的目标之一。牛磺酸,即2-氨基乙磺酸,是体内含量丰富的自由氨基酸,广泛存在于人及动物体的细胞内,具有多种生理作用:调节细胞钙稳态、维持细胞内外渗透压平衡、清除自由基、稳定生物膜、抑制炎性细胞因子如TNF-α IL-1β的产生。但是在胰腺移植过程中牛磺酸是否具有保护作用尚未见报道,本实验通过大鼠胰十二指肠移植造成胰腺缺血再灌注损伤模型,观察胰腺移植术后胰腺组织病理学变化、血清淀粉酶和TNF-α、IL-1β的变化,研究牛磺酸通过抑制胰腺组织TNF-α、IL-1β的表达发挥抗缺血再灌注损伤的作用,以期减少胰腺移植术后并发症的发生,提高移植术后效果。 材料与方法 分组:取wistar大鼠(体重200-250g、购于中国医科大学实验动物部)30只随机分为三组(n=10):①对照组:CMU-1液保存6h再移植、②实验组A:CMU-1液+牛磺酸5mmol/L保存6h再移植、③实验组B:CMU-1液+牛磺酸10mmol/L保存6h再移植(CMU-1液是本实验室配制的多器官保存液)。并分别于移植术后2小时和术后6小时取腔静脉血作胰腺外分泌功能即血清淀粉酶测定,取胰腺组织作病理检查。通过免疫组化染色观察炎性细胞因子TNF-α及IL-1β在不同时间段的表达情况。应用计算机图像分析系统测定其积分光密度值(IOD)。SPSS10.0软件进行方差分析及t检验,P<0.05有统计学意义。 结果 胰腺移植通血后2小时血清淀粉酶值均增高,加入牛磺酸后淀粉酶升 高较对照组低,三组间差异具有显著性P0.05。通血6小时后各组淀粉 酶均显著升高,以对照组升高最明显,加入牛磺酸后能抑制血清淀粉酶升 高,同一时间段内各组间差异具有显著性P0.05。随着牛磺酸浓度的增 大其作用也显著。通过光镜检查,对照组胰腺移植后2小时可见胰腺间质 充血水肿,血管周围有炎性细胞浸润,并且伴有出血,间隙增宽,腺泡受压萎 缩,胰腺腺泡细胞内有空泡形成,并可见腺泡细胞死亡,随着再灌注时间的 延长,6小时组炎性病变逐渐加重。实验组A:间质轻度水肿,腺泡轻度肿 胀,无明显受压,无出血,血管周围少量炎细胞浸润,腺泡细胞内无空泡形 成,在相同时限内胰腺炎症明显减轻,且随着再灌注时间的延长其炎性病变 加重不明显。实验组B:在光镜下与实验组A无明显差别。通过免疫组化 检查,胰腺移植后2小时,胰腺组织内即有TNF一a及几一甲的表达,加人 牛磺酸后能明显抑制,I’NF一a及IL一lp的表达,并且有剂量依从关系,三 组间的差异具有显著性,P0.05。移植后6小时TNF一a及IL一lp在各 组间的表达均增多,但加人牛磺酸组更能明显下调TNF一。及IL一1日的表 达,各组内的差异具有显著性P0.05。 结论 1、TNF一a和IL一1日在胰腺缺血再灌注损伤过程中起重要作用。 2、牛磺酸作为一种细胞保护剂能够抑制TNF一。和IL一1日的产生、抗 细胞水肿,减轻胰腺缺血再灌注损伤,减轻胰腺炎症。


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