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Aβ-AD动物模型建立及NGF治疗的实验研究

佡剑非  
【摘要】:目的 阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)是一种发病率高、危害大的中枢神经系统变性疾病,以进行性记忆和识别功能障碍为主要症状。β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在AD脑中的沉积是AD发病的中心环节。脑内胆碱乙酰转移酶(Choline acetyl transferase,ChAT)活性下降被认为是AD的标志性生化特征。近年来研究表明AD与细胞凋亡密切相关,神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是中枢胆碱能系统重要的神经营养因子,具有明显的抗凋亡作用。 本实验通过Aβ脑室内注射建立AD大鼠模型,观察大鼠行为学改变、脑内各部位ChAT活性变化,为AD研究提供一个较为理想的模型。观察AD模型大鼠脑内神经元凋亡及神经生长因子表达改变情况,寻找两者之间联系,探讨AD的发病机制。通过脑室内注射给予NGF治疗,观察动物行为学变化、各部分脑组织ChAT的活性变化、神经元凋亡情况,观察NGF对AD的治疗效果,探讨治疗机理,为进一步的神经生长因子治疗提供动物实验基础。 方法 1.动物模型制备:行为学观察及ChAT活性测定 24只大鼠随机分为4组:对照组、Aβ注射后7天、Aβ注射后14天、Aβ注射后28天组,每组6只。大鼠2%戊巴比妥腹腔注射麻醉后,按图谱位置定位,用微量注射器缓慢将药物注入右侧脑室。Aβ模型组注射Aβ1-42,每次7μg,连续3天。Aβ注射组分别于最后一次药物注射后第7天、14天、28天宰杀取材,对照组于最后一次药物注射后28天取材。取材前2天进行Morris水迷宫试验,观察AD大鼠行为学改变。宰杀时快速断头取脑,


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