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大鼠骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的体外研究

孙津津  
【摘要】:目的 间充质干细胞(mesenehymal stem cells, MSC)来源于中胚层(Mesoderm),具有多向分化能力。大量研究表明,MSC可能在一定条件下向内皮细胞分化。本实验以建立大鼠骨髓MSC的培养体系为基础,研究MSC体外向内皮细胞分化的特性,体外观察模拟的心肌局部微环境及心肌缺血微环境对MSC向内皮细胞分化的影响。 方法 应用4周以内的大鼠骨髓分离培养MSC,进行体外扩增,对其形态学、增殖能力及向成骨和脂肪细胞分化的功能进行鉴定;在以上实验的基础上,建立大鼠的心肌梗死模型,制备不同时间心梗心肌的匀浆,参与到由成血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子β(bFGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组成的成内皮诱导体系中,应用免疫组化方法检测vWF、CD31特异性抗原,RT-PCR检测vWF的表达,并进行吞噬实验,并观察心肌匀浆对MSC增殖和成内皮分化的影响。 结果 通过对培养细胞的形态学及功能鉴定,证明其为MSC,并具有向成骨、成脂肪细胞分化的能力;生长因子加或不加心肌匀浆诱导后的细胞,部分呈vWF、CD31阳性,Ac-LDL吞噬实验阳性,梗塞心肌匀浆与生长因子共同作用,能促进MSC向内皮细胞分化,vWF阳性率提高,P0.05,RT-PCR显示1-2周的梗塞心肌匀浆vWF的基因表达最多。


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