抑制端粒酶活性与宫颈癌细胞增殖关系的研究
【摘要】:目的
近年来的大量研究表明肿瘤细胞的永生化(immortality)与端粒酶活性密切相关,抑制端粒酶活性可达到抑制肿瘤细胞增殖、阻止肿瘤细胞永生化、促进肿瘤细胞死亡的目的。本研究旨在通过观察体外培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞在二氧化硒(selenium dioxide,SeO_2)的作用下,HeLa细胞生长增殖的变化及端粒酶活性的变化,探讨宫颈癌细胞的增殖与端粒酶活性之间的关系。
方法
SeO_2分成3、10、30μmol/L三种浓度作用于HeLa细胞,作用时间分为24、48、72和96h;采用噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度SeO_2对HeLa细胞作用不同时间后HeLa细胞增殖的变化;通过倒置显微镜观察不同浓度SeO_2对HeLa细胞作用不同时间后HeLa细胞形态的变化;用TRAP-PCR-银染法检测不同浓度SeO_2对HeLa细胞作用不同时间后HeLa细胞端粒酶活性的变化。
结果
(1) HeLa细胞形态学变化
在SeO_2作用下,HeLa细胞逐渐变圆悬浮,细胞间接触变松,折光性及贴壁能力减弱,细胞增殖减慢,细胞中颗粒逐渐增多变粗,悬浮细胞形状逐渐变不规则,随药物浓度增高可见细胞周围碎片增多。3μmol/L SeO_2处理过的HeLa细胞在短时间内(≤48h)其生长状态与对照组无明显差异,只是在72h时后才出现可见形态差异;10μmol/L SeO_2处理过的HeLa细胞生长