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静磁场对大鼠成骨细胞及其牙周炎组织影响的研究

仇丽鸿  
【摘要】:目的 随着生物磁技术的迅猛发展,磁治疗在医学中的基础和临床应用研究越来越受到关注,但是有关静磁场对牙周炎组织生物效应的研究未见报道。 成骨细胞是保持骨形态结构和性能的最小结构和功能单位,作为骨组织的重要功能细胞,在骨的形成过程中起着关键作用。成骨细胞的增殖、骨基质的分泌和钙盐沉积对骨的形成、重建和修复具有重要意义。 本实验通过建立体外培养大鼠颅骨成骨细胞实验模型,排除了体内复杂的生物环境因素的影响,观察不同剂量的静磁场对体外培养的成骨细胞生长的直接效应,专一的分析研究静磁场刺激对成骨细胞的生长和功能变化的影响;建立牙周炎动物实验模型,研究静磁场对牙周膜组织结构、功能的影响。从细胞水平和分子水平探讨静磁场对骨生长的作用机制,为临床选择合适的磁场参数,科学的利用磁场疗法,提供实验依据。 方法 1 静磁场的设计 将钕铁硼永磁体充磁后固定于特制的长方形槽内,其上方可以放置各种细胞培养板,调节槽装置的高度,使培养板底部的磁场强度分别为0Gs、400Gs、620Gs、830Gs、1080Gs。 2 大鼠颅骨成骨细胞的分离、培养 无菌操作下取出Wistar乳鼠头盖骨,刮去骨膜和软组织,经0.25%胰酶和1mg/mlⅡ型胶原酶消化后,应用差速黏附法分离成纤维细胞,置于37℃、5%CO_2饱和湿度的培养箱中培养,3天换液,待细胞长满平底后传代,备用。 3 成骨细胞的增殖活性测定 成骨细胞接种于96孔培养板内培养24h,将各培养板分别放入不同强度磁场中,继续培养24h、48h、72h。在每时间点应用MTT法,测定490nm


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