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盐酸戊乙奎醚对大鼠体外循环肝脏损伤的保护作用的研究

蔡大升  
【摘要】: 目的 探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠体外循环肝脏损伤的保护作用及其机制。 方法 32只健康成年雄性清洁级SD大鼠随机分4组,组8只,假手术组(Sham组)、型组(Mod组)、酸戊乙奎醚低剂量组(L-PHC组)、酸戊乙奎醚高剂量组(H-PHC组)。术前6h禁食水,10%水合氯醛0.3ml/100g腹腔注射,术中根据情况追加维持麻醉深度。通过鼠口插入气管导管,连接小动物呼吸机。吸入纯氧,呼吸频率60次/分,吸呼比为1:2,潮气量8—10ml/kg,根据血气分析结果调节呼吸机参数,使PaCO_2维持在35—45mmHg。经尾动脉插入22G静脉留置针后接动脉测压表;经股动脉逆行插入22G静脉留置针作为动脉灌注管;经颈静脉插入18G静脉留置针穿刺直至右心房水平作为静脉引流管,经股动脉侧管注射肝素钠500IU/kg肝素化后开始转流(Sham组只进行上述操作不行CPB)。L-PHC与H-PHC组体外循环预充液中分别按0.6mg/kg及2mg/kg加入盐酸戊乙奎醚。转流开始时灌注流量约为35ml/kg/min,逐渐增加到80-100ml/kg/min。转流开始后停呼吸机,氧合器供氧(FiO_2 100%),氧流量与灌注流量比值保持在0.8-1.0。转流过程中平均动脉压保持在60-80mmHg。转流开始后即应用变温水箱注意保温,转流稳定后将肛温逐渐降至约32.0℃,转流50—60min时逐渐复温,直肠温度达到约37.0℃时停止CPB,恢复机械通气,总转流时间60min左右。CPB过程中持续监测心率、平均动脉压(MAP)、肛温、呼吸频率及动脉血气(Sham组也进行相同监测)。Mod组、L-PHC组、H-PHC组在停转流(Sham组也于相同时点)取动脉血测定大鼠丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的活性,取血后立即处死大鼠,取肝脏组织于H-7200透射电镜下观察超微结构的变化。 结果 Mod组、L-PHC组、H-PHC组血清ALT、AST活性均高于Sham组(P<0.05或P<0.01);Mod组、L-PHC组、H-PHC三组相比升高程度依次为Mod组>L-PHC组>H-PHC组(P<0.05或P<0.01)。Mod组、L-PHC组、H-PHC组电镜下观察肝细胞线粒体均有不同程度的肿胀,线粒体膜和嵴有破坏。Mod组的损伤更明显,发生空泡变性,粗面内质网、溶酶体和核糖体明显减少,细胞核结构明显破坏,而L-PHC组、H-PHC组肝细胞线粒体损伤较轻,并且有新生的线粒体,细胞核结构尚完整。H-PHC组与L-PHC组相比,肝细胞线粒体与粗面内质网等超微结构的损伤程度更轻,空泡消失,新生的线粒体数量更多。 结论 盐酸戊乙奎醚对大鼠体外循环肝脏损伤有一定的保护作用,高剂量时效果更明显。


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