收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

组织工程化骨修复兔下颌骨缺损同期种植体植入的实验研究

王程越  
【摘要】: 前言 临床上对各种原因引起的伴有牙齿缺失的较大范围颌骨缺损患者进行快速有效的功能性修复,即在修复颌骨缺损的同时完成种植体的Ⅰ期植入,以缩短患者缺牙时间、减轻患者多次手术的痛苦,尽早完成咬合、咀嚼、吞咽、发音等功能的修复,是口腔颌面外科、口腔种植科以及口腔修复科医生所共同面对的一个难题。近年来组织工程学得到了快速的发展,其中以种子细胞、支架材料、生长因子为核心内容的骨组织工程技术,通过体外构建细胞——支架复合体,即组织工程化骨,用于替代自体骨、异体骨、异种骨被认为是最具潜力和发展前途的骨缺损修复材料。为提高颌骨缺损修复同期种植体植入的成功率,除需选择理想的骨缺损修复材料之外,种植体表面特性也起到了重要作用。为此,本课题尝试着以骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)为种子细胞、纳米羟基磷灰石/胶原(nano-hydroxyapatite/collagen,nHAC)为支架材料、富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)为生长因子来源,于体外构建组织工程化骨用于修复兔下颌骨缺损,并于其中同期植入表面喷砂酸蚀处理的钛种植体(sandblasted and acid-etched titanium,SLA-Ti)和表面喷砂酸蚀处理后羟基磷灰石涂层的钛种植体(hydroxyapatite/sandblasted and acid-etched titanium,HA/SLA-Ti),观察组织工程化骨修复骨缺损的能力及其负载的两种不同表面处理的种植体骨愈合能力的差别,具体内容分为以下五部分: 一、富血小板血浆对骨髓基质细胞生物学特性的影响 目的探讨自体PRP对体外培养的兔BMSCs生物学特性的影响。方法体外培养的兔BMSCs分为实验组和对照组,实验组中加入含1%PRP的DMEM条件培养基,对照组为不含PRP的DMEM培养基,在不同时间点收集两组细胞,分别进行形态学观察、细胞周期分布和增殖指数测定、碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定、骨钙素(OCN)含量测定以及骨桥蛋白基因(opn)mRNA相对表达量的分析。结果实验组细胞具有成骨细胞的形态学特征;PRP作用7d后S期细胞比例较对照组明显增加,细胞增殖指数由22.89±1.24增至33.15±1.02,具有统计学意义(P<0.01);实验组ALP染色呈阳性,且ALP活性、OCN含量均较对照组明显提高,差异具有统计学意义:opn mRNA相对表达量是对照组的3.48倍。结论PRP可促进兔BMSCs的增殖并可提高兔BMSCs的体外成骨潜能,使其向成骨细胞转化。 二、纳米羟基磷灰石/胶原对富血小板血浆促进骨髓基质细胞成骨向分化的影响 目的探讨nHAC作为支架材料对PRP体外诱导兔BMSCs向成骨细胞分化能力的影响。方法PRP分别作用于与nHAC联合培养的兔BMSCs及常规培养的兔BMSCs,利用扫描电镜观察兔BMSCs在nHAC上的生长情况;通过ALP活性测定、OCN含量测定以及opn mRNA相对表达量的分析,比较两种培养条件下PRP诱导兔BMSCs向成骨细胞分化能力上的差异。结果联合培养的兔BMSCs在nHAC上生长良好,其ALP活性、OCN含量均较常规培养明显增加,且opn mRNA相对表达量是常规培养组的4.78倍。结论nHAC作为支架材料可明显提高PRP诱导兔BMSCs向成骨细胞分化的能力。 三、钛种植体喷砂酸蚀表面羟基磷灰石涂层对骨髓源成骨细胞生物学特性的影响 目的探讨HA/SLA-Ti对骨髓源成骨细胞(marrow-origin osteoblasts,MOOBs)生物学特性的影响。方法应用离子束辅助沉积(ion beam assisted deposition,IBAD)技术在喷砂酸蚀(sandblasted and acid-etched,SLA)处理的钛种植体表面制备羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)涂层,将MOOBs分别接种于HA/SLA-Ti和SLA-Ti表面,观察其生长情况,并对两组MOOBs增殖指数、ALP活性、OCN含量以及opn mRNA相对表达量进行比较。结果MOOBs在HA/SLA-Ti表面生长良好,其细胞增殖指数、ALP活性以及OCN含量明显高于SLA-Ti组;且opn mRNA相对表达量是SLA-Ti组的3.25倍。结论应用IBAD技术在钛种植体SLA表面制备HA涂层,可明显促进MOOBs的增殖及其成骨表型的表达,是一种有应用前景的种植体表面处理方法。 四、组织工程化骨修复兔下颌骨缺损的实验研究 目的探讨以兔BMSCs为种子细胞、nHAC为支架材料、PRP为生长因子来源,于体外构建的组织工程化骨修复兔下颌骨缺损的能力。方法兔下颌骨体部范围为15mm×15mm的全层骨缺损分别采取相应方法修复:A组,组织工程化骨修复;B组,自体髂骨修复;C组,单纯nHAC材料修复;D组,空白对照组,缺损不做修复。分别于术后1、3、6个月取材,进行大体标本观察、放射性核素骨显像、骨密度测定及组织学观察。结果大体标本观察显示,术后A、B两组骨缺损区域逐渐由新生骨组织修复,C组骨缺损区域仅形成了类软骨样组织,D组无骨组织形成,骨缺损区域由纤维结缔组织充填;放射性核素骨显像结果显示,术后1个月、三个月时,A、B两组成骨代谢能力明显优于C组、D组,而A、B两组之间无显著差异,术后6个月时,各组之间骨代谢能力无明显差异;骨密度测定结果显示A、B、C三组骨缺损区域骨密度逐渐增加明显高于D组,术后3个月以后A组、B组骨密度较C组明显提高,而A、B两组之间无显著差异;组织学检查结果显示,A组在术后1个月时可见小片状类骨质出现,nHAC开始降解,术后3个月时新生骨成大片状结构,术后6个月时nHAC几乎全部降解,缺损由骨组织修复,其成骨量与B组无明显差异却明显大于C组,D组仅为纤维组织修复。结论组织工程化骨修复颌骨缺损能力与自体髂骨相似而强于单独使用nHAC,且nHAC材料于体内可完全降解,因此BMSCs与nHAC及PRP复合所构建的组织工程化骨是一种良好的骨缺损替代材料。 五、组织工程化骨修复兔下颌骨缺损同期不同表面处理的钛种植体植入的实验研究 目的观察组织工程化骨修复兔下颌骨缺损同期进行HA/SLA-Ti和SLA-Ti种植体植入后,种植体与周围新生骨组织发生骨整合的情况。方法兔BMSCs复合nHAC及PRP用于修复兔下颌骨颊侧范围为15mm×15mm的全层骨缺损,同期分别植入HA/SLA-Ti种植体(A组)和SLA-Ti种植体(B组)。术后1、3、6个月取材,进行大体标本观察、X线检查、扫描电镜观察、组织学检查及种植体的推入实验和拉出实验。结果大体标本观察显示,A组术区逐渐由新生骨组织修复,种植体周围形成完善的骨结合界面,界面骨成熟;B组术区骨愈合状态佳,但种植体周围仍存在少量纤维组织。X线检查结果显示,术后1个月A、B两组骨缺损区域骨密度较低,种植体周围大部分为X线透射影;术后3个月A、B两组骨缺损区域骨密度增加,与B组相比A组种植体周围有较多X线阻射影;术后6个月A组种植体周围为与正常骨组织密度相似的X线阻射影,B组种植体周围也为与宿主骨密度接近的X线阻射影,但密度并非均匀一致。扫描电镜结果显示,A组种植体较B组种植体与周围新生骨结合的更紧密。组织学检查的结果显示,A组新生骨与种植体表面直接结合,骨形成较B组种植体表面骨形成提前,B组种植体与新生骨之间存在纤维组织。推入实验和拉出实验结果显示,术后1个月时A、B两组种植体的推入应力和拉出负荷无明显差异,术后3个月后A组种植体的推入应力和拉出负荷明显较B组提高,差异具有统计学意义。结论修复兔下颌骨缺损的组织工程化骨内同期植入的种植体,可与新生的骨组织形成良好的骨结合,其中HA/SLA-Ti种植体的骨结合能力较SLA-Ti种植体强,且骨愈合时间也较后者提前。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 东耀峻;应用新型异体成形托盘整复下颌骨初步报告[J];国外医学.口腔医学分册;1975年04期
2 白碧荣;新鲜异体下颌骨移植修复下颌骨缺损护理体会[J];护士进修杂志;1995年07期
3 于永红,李祖兵,胡铁霞,戈春城;钛重建板修复下颌骨缺损的临床应用[J];口腔医学研究;2005年01期
4 刘境华,于子莹;冷冻同种胚胎骨移植修复下颌骨缺损的体会[J];白求恩医科大学学报;1994年05期
5 刘流,漆雪梅,谢春,吴恩格;复合生物陶瓷人工骨修复下颌骨缺损的临床研究[J];口腔颌面外科杂志;1995年04期
6 陈世润,李兴,聂光,马雪科,陈玉,蔡林方,李嵩杰;种植体血管化髂骨移植修复下颌骨缺损一例报道[J];中国口腔种植学杂志;1996年02期
7 秦顺明,吴森斌;自体骨移植即时修复下颌骨缺损37例临床分析[J];南通医学院学报;1996年01期
8 梅梅;去皮质髂骨移植修复下颌骨缺损的护理[J];护理学杂志;1997年03期
9 李祖兵,余世斌,东耀峻,赵吉宏;下颌骨缺损重建植入材料的回顾性研究[J];实用口腔医学杂志;2003年01期
10 李吉辰;带血管蒂腓骨组织瓣游离移植修复下颌骨缺损[J];黑龙江医学;2004年12期
11 杨连,明卫;带血管的骨骼游离移植修复下颌骨缺损的护理[J];中国实用护理杂志;2005年12期
12 王昆润;外伤性下颌骨缺损在超高弥散性羟基磷灰石作用下的骨修复[J];国外医学.口腔医学分册;1999年04期
13 崔念晖!100081,张益!100081,俞光岩!100081,潘瑾!100081;下颌骨缺损自体游离髂骨移植后骨吸收及其影响因素的临床分析[J];现代口腔医学杂志;2000年03期
14 蔡松泉,范希明,冉维志;带血管蒂腓骨皮瓣在下颌骨缺损治疗中的应用[J];邯郸医学高等专科学校学报;2001年04期
15 刘霜印,苏京锁,付新国,曹保富;钛板携带种植体修复下颌骨缺损的动物试验[J];口腔医学研究;2005年02期
16 黄静娜;胡顺广;魏远坚;;下颌骨缺损修复重建研究进展[J];中国美容医学;2009年10期
17 刘方曜;用带旋髂深血管蒂游离复合髂骨瓣重建下颌骨缺损[J];实用口腔医学杂志;1991年01期
18 彭玲玲;自体髂骨移植修复下颌骨缺损18例[J];徐州医学院学报;1998年05期
19 朱丽娜;带血管蒂髂骨移植修复下颌骨缺损的护理[J];开封医专学报;2000年02期
20 潘瑾,张益,毛驰,彭歆,俞光岩;三维仿真头模在下颌骨缺损重建中的应用:1例报道[J];中国口腔颌面外科杂志;2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曲昌锋;;钛重建板修复下颌骨缺损[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
2 秦兴军;吴文征;张陈平;王宛山;;基于快速原型技术的下颌骨缺损修复重建术[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
3 王琼超;;自体骨移植修复下颌骨缺损的临床观察[A];海南省口腔医学会第二次会员代表大会暨学术会议论文汇编[C];2004年
4 蔡志刚;张杰;张建国;赵福运;林野;郭传瑸;于国霞;钱三楼;;下颌骨缺损的修复与重建-附135例病例分析[A];2004年中国口腔颌面修复重建外科学术会议论文汇编[C];2004年
5 蔡志刚;张杰;张建国;赵福运;林野;郭传瑸;于国霞;钱三楼;;240例下颌骨缺损修复与重建的体会[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
6 周晓;曹谊林;崔磊;喻建军;李赞;陈杰;左朝晖;刘广鹏;莫逸;胡炳强;吴胜其;;组织工程骨修复下颌骨缺损的临床研究(附2例报告)[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
7 聂宝达;;单侧下颌骨缺损修复一例[A];全国第六届口腔修复工艺学学术会议论文汇编[C];2007年
8 赵吉宏;李祖兵;施斌;夏海斌;;同期植入种植体的血管化髂骨肌瓣修复下颌骨部分缺损[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年
9 马金玲;潘巨利;王海涛;;单纯骨膜下成骨完成小型猪下颌骨缺损的研究[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年
10 张庆福;吕春堂;樊堂堂;周中华;汪大林;李郝林;;计算机辅助个体化功能性修复下颌骨缺损的研究—个体化带种植体三维钛网修复体的制作[A];2004年中国口腔颌面修复重建外科学术会议论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 殷学民;下颌骨缺损骨瓣修复中受区的应用解剖学研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
2 张庆福;计算机辅助个体化功能性修复下颌骨缺损的研究[D];第二军医大学;2005年
3 柳玉晓;放疗后牵张成骨修复下颌骨缺损的可行性研究[D];第四军医大学;2009年
4 周丽斌;应用CAD-RP技术设计并优化个体化支架修复下颌骨缺损[D];第四军医大学;2011年
5 袁继龙;复合骨生长刺激因子的胶原膜修复下颌骨缺损的应用研究[D];南方医科大学;2007年
6 张圃;转移盘牵引成骨整复下颌骨缺损的实验研究[D];第四军医大学;2001年
7 于开涛;离体时间对非血管化骨移植同期种植体植入愈合影响的实验研究[D];第四军医大学;2005年
8 王翔;应用自体肋骨异位预构血管化下颌骨的实验研究[D];武汉大学;2013年
9 吴景泉;自体微小颗粒骨修复下颌骨缺损的研究和应用[D];第一军医大学;2006年
10 武京国;构建同种异体组织工程骨及修复大动物骨缺损的实验研究[D];北京协和医学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张新莲;非血管化髂骨移植修复下颌骨缺损的临床研究[D];山东大学;2013年
2 魏栋;重建钛板修复下颌骨缺损临床总结[D];浙江大学;2005年
3 王胜伟;富含血小板血浆复合牛骨粉修复下颌骨缺损实验研究[D];中国协和医科大学;2007年
4 朱晓瑜;应用选择性激光烧结法制作修复下颌骨缺损钛植入体的基础研究[D];第四军医大学;2005年
5 王悦;三维构建生物材料修复下颌骨连续性缺损的实验研究[D];第二军医大学;2005年
6 张国权;肿瘤性下颌骨缺损颌(牙合)功能重建的动物实验研究[D];暨南大学;2005年
7 宁博强;重组人骨形成蛋白2复合胶原基纳米骨修复下颌骨缺损的实验研究[D];南方医科大学;2009年
8 王新;BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶修复大鼠下颌骨缺损的实验研究[D];兰州大学;2013年
9 田刚;Bio-oss复合纤维蛋白胶、BMP及GBR膜对犬下颌骨缺损成骨修复的实验研究[D];第二军医大学;2007年
10 胡进平;新型纳米复合材料对兔下颌骨缺损修复的研究[D];吉林大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 韩富明;口腔种植体研究获军队科技进步一等奖[N];中国医药报;2004年
2 第四军医大学附属口腔医院教授 马秦;修复颌面创伤 结束毁容噩梦[N];健康报;2011年
3 ;预构血管化骨与非血管化骨游离移植的比较实验研究[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978