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新辅助化疗对晚期卵巢浆乳癌组织PI3K、P-AKT、PTEN表达的影响及临床意义探讨

伍丹丹  
【摘要】: 目的 探讨新辅助化疗对上皮性卵巢癌组织中PI3K、P-AKT、PTEN表达的影响,为评价新辅助化疗在治疗晚期卵巢浆乳癌中的临床意义提供理论依据。 方法 一、标本的采集 标本来源于中国医科大学附属第一医院妇科2006年9月~2007年9月经手术病理证实的晚期卵巢浆液性乳头状囊腺癌组织共37例(FIGO分期:Ⅲ期35例,Ⅳ期2例)。患者均行肿瘤细胞减灭术。其中行先期化疗(1-3个疗程)者12例为实验组,化疗为PC方案(卡铂400mg/m~2,单次腹腔内注射+环磷酰胺600mg/m~2,静脉注射)。术前未化疗者25例为对照组。两组术后化疗方案仍为PC方案,剂量与用法同前。术后随访:其中术后满6个化疗疗程者30例,大于2个疗程少于6个疗程者7例。截至到2008年3月,37例患者1人死亡。取材:术中快速取卵巢癌组织0.5cm×0.5cm两块,放入两个EP管中,分别加入1mlRNAout试剂及1ml蛋白裂解液置入液氮中冷冻,4小时后转入-70℃低温冰箱保存备用。 二、实验方法 (一)应用RT-PCR技术检测PTEN mRNA在卵巢癌组织中的表达,步骤包括: 1、采用RNA out试剂说明书所提供的方法进行总RNA的提取。 2、按RT-PCR试剂盒说明配置反应体系后进行反转录反应(RT)及聚合酶链反应(PCR)。 3、mRNA表达的半定量分析。 (二)应用western blot技术检测PI3K及P-AKT蛋白在卵巢癌组织中的表达,步骤包括: 1、蛋白样品的制备。 2、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 3、转膜。 4、封闭。 5、一抗杂交。 6、二抗杂交。 7、底物显色。 8、计算机扫描分析结果。 三、统计学分析 结果分析应用美国SPSS12.0统计软件分析系统。资料采用t检验和Fisher确切概率法比较差异。(检验水准α=0.05) 结果 1、先期化疗组卵巢癌组织中PTEN mRNA的表达水平明显高于未化疗组,两组之间差异有显著性意义(P<0.01)。 2、先期化疗组卵巢癌组织中PI3K蛋白的表达水平明显低于未化疗组,两组之间差异有显著性意义(P<0.05)。 3、先期化疗组卵巢癌组织中P-AKT蛋白的表达水平明显低于未化疗组,两组之间差异有显著性意义(P<0.05)。 4、先期化疗组满意减瘤术(残留灶<2cm)比率明显高于未化疗组,两组之间差异有显著意义(P<0.05)。 5、先期化疗组经过术后两个疗程化疗后CA125平均水平明显低于术前未化疗组,两组之间差异有显著意义(P<0.01)。 6、先期化疗组术后残留灶<2cm患者术后半年临床缓解率高于残留灶>2cm患者,两组之间差异有显著意义(P<0.05)。 结论 1、新辅助化疗可以下调卵巢癌PI3K及P-AKT的蛋白表达水平,同时上调PTEN mRNA的表达水平,促进细胞凋亡达到抗肿瘤的作用。 2、新辅助化疗可以提高手术切净率,加快CA125下降水平,提高患者术后近期缓解率。


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