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血必净注射液对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌中白介素-1β的影响

路平  
【摘要】: 目的 心肌缺血再灌注损伤是临床实践中常见的组织器官损伤,其准确机制仍不十分清楚。研究结果表明心肌缺血再灌注损伤是一种急性炎症反应,缺血再灌注时心肌组织白介素-1β(IL-1β)产生增加是导致心脏功能障碍和心肌细胞坏死的重要原因之一,抑制IL-1β的产生能减轻心肌细胞损伤、有助于缺血心肌功能的恢复。近年来,中药防治心肌缺血再灌注损伤的研究取得了一定进展。血必净注射液是从36组中药处方中筛选而来,具有调节免疫及炎性介质、改善微循环、保护血管内皮细胞、抗细菌毒素、降低内毒素水平的作用。本研究应用Langendorff离体心脏工作模型,观察血必净注射液对心肌缺血再灌注损伤中炎性细胞因子IL-1β的影响,并探讨其减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤可能的机制。 材料与方法 选择健康Wistar大鼠30只,体重200±20g,雌雄不限,按随机化原则分成对照组与血必净组,每组15只。实验大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉,腹腔注射肝素钠抗凝。开胸并迅速取出心脏,立即浸入4℃K-H液中,经主动脉插管以后连接于langendorff离体心脏灌注装置上,以37℃K-H液灌注,灌注压恒定为75cmH_2O。经15min的自然灌注平衡后,对照组用ThomasⅡ停搏液停搏,血必净组用含有血必净注射液的ThomasⅡ停搏液进行停搏(100ml ThomasⅡ停搏液中加4ml血必净注射液)。两组心脏经常温(37℃)缺血30min后,以37℃K-H液再灌注至复灌后120min。实验过程中分别计量缺血前10-15min、缺血再灌注55-60min、缺血再灌注115-120min的冠脉流出液流量(CF),并留取各时间段冠脉流出液3ml,放入-20℃冰箱内保存,后用全自动生化检测仪检测肌酸激酶(CK)含量;实验结束后留取部分左心室心尖部心肌组织立即放入10%福尔马林溶液中,固定20小时(4℃冰箱内保存)后制成蜡块标本,于光学显微镜下观察心肌形态学变化;另取部分左心室心肌于-70℃冰箱冰冻保存,采用酶联免疫方法(ELISA)测定心肌缺血再灌注120minIL-1β含量;采用硫代巴比妥酸法(TBA)测量心肌缺血再灌注120min丙二醛(MDA)的含量。采用SPSS13.0统计软件进行数据处理,计量资料以均数±标准差((?)±s)表示,组间比较采用重复测量数据的方差分析,两两比较用多重比较t检验,P<0.05为差异有统计学意义。 结果 1、CF的变化:与对照组相比,血必净组缺血再灌注以后各时间点的CF值明显升高(P<0.05)。 2、冠脉流出液中CK的变化:与对照组相比,血必净组缺血再灌注以后各时间点的CK值明显降低(P<0.05)。 3、心肌形态学变化:对照组心肌组织有较多的淋巴细胞浸润,炎症反应较明显;血必净组心肌细胞形态基本正常,心肌组织淋巴细胞浸润较少,炎症反应较轻。 4、心肌组织的MDA的浓度的变化:与对照组对比,血必净组心肌缺血再灌注120min MDA的值明显降低(P<0.05)。 5、心肌组织的IL-1β浓度变化:与对照组相比,血必净组心肌缺血再灌注120min的IL-1β含量明显降低(P<0.05)。 结论 1、血必净注射液可以增加缺血再灌注后心肌的CF,从而增加心肌微循环灌注减轻心肌细胞缺血再灌注后的损伤。 2、血必净注射液可以减少缺血再灌注心肌的冠脉回流液中CK的含量,及心肌组织中MDA的含量,说明血必净注射液对大鼠缺血再灌注后心肌有一定的保护作用。 3、血必净注射液可以显著减少缺血再灌注心肌组织IL-1β的生成,说明血必净注射液的心肌保护作用机制可能是通过抑制IL-1β生成来减轻缺血再灌注后心肌组织的炎症反应来实现的。


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