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AQP9在大鼠局灶性脑缺血模型的表达及甲强龙对其的影响

杨洋  
【摘要】: 前言 脑水肿是缺血性脑血管病最常见的并发症之一,是造成脑缺血病死率、致残率较高的主要因素,缺血性脑水肿形成机制的研究一直是神经科学重点探讨的课题之一。研究缺血性脑水肿病理过程中,水通道蛋白-9(aquaporin-9,AQP9)表达变化的时空规律及其与脑水肿形成的关系,初步探讨缺血性脑水肿过程中AQP9的作用及甲强龙对其表达的影响 材料和方法 成年健康SD大鼠190只,随机分为假手术对照组,缺血组,干预组,用大脑中动脉栓塞法制作脑缺血动物模型,假手术对照组除不插线栓外,其余操作与缺血组相同。每组在造模成功后6 h、24 h、72 h取出大鼠脑组织,分别采用HE染色、进行病理观察,干湿重法计算脑组织含水量变化,免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)、RT-PCR、测定各组相应时间点水肿区AQP9及其mRNA含量的变化。 结果 在假手术对照组,脑组织形态、脑含水量、AQP9及其mRNA的分布及表达含量在各时间点均无明显变化。脑缺血后,光镜观察可见脑组织出现缺血性改变:细胞及血管周围间隙明显扩大,部分细胞坏死,胞核浓染或消失,胶质细胞增生。缺血6小时后,脑含水量明显升高,并随缺血时间的延长而逐渐增加,在缺血后72小时仍较高水平。免疫组化和原位杂交结果显示,AQP9及其mRNA在海马、大脑皮质等部位的细胞上呈阳性表达。脑水肿组织中AQP9及其mRNA的含量随脑缺血时间的延长而增加,在缺血后72小时仍较高水平。在脑水肿的形成过程中,AQP9 mRNA和蛋白的表达呈高度正相关(r=0.9068,p0.05),AQP9的表达与脑含水量的变化亦呈显著正相关(r=0.9139,p0.05).在给MP干预后,AQP9mRNA和蛋白的表达仍呈高度正相关(r=0.9055,p0.05),AQP9的表达与脑含水量的变化亦呈显著正相关(r=0.9006,p0.05) 结论 脑缺血后,伴随脑水肿的加重,AQP9蛋白及其基因表达上调,提示脑缺血后,AQP9表达上调是可能是缺血性脑水肿形成的重要因素,当给予MP可以降低起AQP9的过度表达,继而减轻脑水肿的产生,提示可能是MP降低AQP9的表达来减低水肿的发生。


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